| 产品名称： | 克罗诺杆菌筛选肉汤；CSB培养基 |
|---|---|
| 英文名称： | Cronobacter Screening Broth；CSB |
| 培养基类型： | 选择性培养基 |
| 级别： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA（艾礼培养基） |
| 产品目录号： | M110-01、M110-02 |
| 产品规格： | 250g、500g(添加剂需另购) |
| 产品外观： | 浅黄色至浅棕色均一粉末。 |
| 灭菌后颜色与澄清度： | 紫色透明溶液。 |
| 保存条件： | 密封，2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
| 注意事项： | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述：
克罗诺杆菌筛选肉汤(Cronobacter screening broth)简称CSB培养基，是克罗诺杆菌增菌肉汤，用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。工作原理
克罗诺杆菌原名阪崎肠杆菌(E. sakazakii)，是革兰氏阴性，兼性厌氧，杆状，能运动的杆菌，属于肠杆菌科家族。克罗诺杆菌与肠杆菌属和柠檬酸细菌属有较近的亲缘关系。克罗诺杆菌最初被描述为产黄色色素的阴沟肠杆菌（25°C，在TSA培养基上产黄色色素）。在1980的DNA-DNA杂交研究中显示，这些菌株是一个独特的产毒群，应该被视为一个独立的菌种，并命名为阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）。通过对部分16SrDNA和hsp60基因序列的分析表明，阪崎肠杆菌分离物至少形成4个显著不同的基因组，可能为不同的物种。因此在2007年克罗诺杆菌被正式定义。如今，该物种包括C. sakazakii, C. malonaticus, C.turicensis, C. muytjensii, and C. dublinensis，另外还有第六中未命名菌。克罗诺杆菌能够在很宽的温度范围内生长，最低5.5°C，最高至44-47°C。该微生物对干燥处理具有很强的耐受性，以脱水状态在婴儿奶粉中能够存活2年。加水复原后，能够快速生长。克罗诺杆菌能够引发严重的新生儿感染：坏死性小肠结肠炎、败血病和脑膜炎。伴随脑膜炎和其它感染的致死率为50%，并给存活者带来永久性的神经损伤。幸运的是，新生儿的感染是少见的，但是在各个年龄组都可能发生感染，结果相对不严重。克罗诺杆菌能够穿过人的肠道细胞，在巨噬细胞内复制，并且穿透血脑屏障。
蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。氯化钠维持渗透压平衡。蔗糖是克罗诺杆菌可发酵的糖类。酸碱指示剂溴甲酚紫变色范围pH5.2(黄色)～pH6.8(紫色)。发酵蔗糖产酸，使得培养基的pH下降，溴甲酚紫由紫色变黄色。
用途：
CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。配方与配制方法
| 成分 | g/L |
| 蛋白胨 | 10.0 |
| 牛肉浸粉 | 3.0 |
| 氯化钠 | 5.0 |
| 溴甲酚紫 | 0.004 |
| 蔗糖 | 10.0 |
| 万古霉素 | 0.01 |
| pH | 7.4 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 称取28g本产品，用1000ml去离子水重悬。
2. 121°C灭菌15min。
3. 冷却将近50°C时，加入万古霉素。
4. 混匀后分装到无菌容器中。
实验方法
1. 按照ISO6887、ISO8261或其它标准方法处理待测样本。2. 样品和缓冲蛋白胨水按照1:9的比例混合均质。
3. 37°C±1°C培养18h±2h。
4. 转移0.1ml菌液到10mlCSB培养基中，41.5°C±1°C培养24h±2h。
5. 如果培养基颜色为紫色，结果为阴性。不需进一步处理。如果培养基呈黄色，则按照步骤6操作。
6. 使用10ul接种环，划线接种上一步获得的菌液到CCI琼脂平板上。
7. 倒置平板，在41.5°C±1°C培养24h±2h。
8. 分离1-5个蓝绿色菌落用于验证。
9. 划线接种到TSA培养基上， 37°C±1°C 培养18h±2h。
10. 进行生化验证试验。
结果与分析
35-37°C，培养18-24h后观察培养物特征。ATCC标准菌株在克罗诺杆菌筛选肉汤中生长情况如下：| 标准菌株 (ATCC) | 生长情况 | 培养基颜色 |
| Cronobacter sakazakii (ATCC12868) | +++ | 黄 |
| Staphylococcus aureus (ATCC25923) | - | - |
| Escherichia coli (ATCC25922) | +++ | 紫 |
| Enterococcus faecalis (ATCC29212) | - | - |
