| 出品公司: | ATCC |
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| 细胞名称: | ATCC CCL-228细胞, SW480细胞, SW-480细胞, 人结肠腺癌细胞 |
| 种属来源: | 人 |
| 组织来源: | 结肠 |
| 疾病特征: | Dukes'B型，结肠腺癌 |
| 患者年龄: | 50 |
| 患者性别： | 男 |
| 人种: | 高加索白人 |
| 细胞来源： | SW480是从原发性结肠腺癌中建立的。 |
| 抗原表达: | HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3; blood type B |
| 癌基因： | myc +; myb + ; ras +; fos +; p53 +; sis -; abl -; ros -; src - |
| 基因表达: | 癌胚抗原（CEA）908 ng/106个细胞/10天。CSAp（CSAp-）和结肠抗原3表达为阴性。 |
| 癌细胞诱导： | 能够诱导癌细胞产生 |
| 诱导实验: |
是的，裸鼠，裸鼠皮下接种10的7次方个细胞后，21天内肿瘤以100%的形成（5/5）。
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| 细胞形态: | 上皮样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 培养基: | L-15培养基，90%；FBS，10%。 |
| 产品目录号: | CCL-228 |
| 其他保藏库编号: | ATCC |
| 存储人: | A Leibovitz |
| 生长条件: | 气相：空气；不需要二氧化碳; 温度：37 ℃, |
| 传代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 冻存条件: | 90% 完全培养基+10% FBS，液氮储存 |
| 支原体检测: | 阴性 |
| 安全等级: | 1 |
| 应用: |
该细胞系是一种合适的转染宿主。本品系ras原癌基因第12密码子突变，可作为PCR检测该密码子突变的阳性对照。
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| 核型： | 染色体数目为亚三倍体，共有11-12条标记染色体。在每一个被检测的中期中，有8%的人同时观察到双着丝粒和双着丝粒。 |
| 受体表达： | 表达表皮生长因子（EGF） |
| 癌基因表达： | myc +; myb + ; ras +; fos +; sis +; p53 +; abl -; ros -; src - |
| 基因表达： | 癌胚抗原（CEA）0.7 ng／10的6次方细胞/ 10天；角蛋白；转化生长因子β，Myc+；Myb+；ras+；Fas+；SIS+；ABL-；ROS -；SRC--，HLA-A2，B8，B17；血型A；RH+，免疫酶染色法检测细胞角蛋白阳性，该线阳性表达c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb，sis和fos癌基因。 |
| 致癌性： | 能够诱导癌细胞产生，裸鼠皮下接种10的7次方个细胞后，21天内肿瘤以100%的形成（5/5）。 |
| 病毒易感性： | 能够感染HIV1病毒。 |
| STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 13,14
D13S317: 12
D16S539: 13
D5S818: 13
D7S820: 8
THO1: 8
TPOX: 11
vWA: 16
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| 同工酶: |
ES-D, 1
G6PD, B
PEP-D, 1
PGD, A
PGM1, 2
PGM3, 1
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| 细胞说明： |
建立SW480细胞系后，从同一病人的淋巴结转移中获得的癌细胞系就是见ATCC CCL-227细胞。
CSAp（CSAp-）和结肠抗原3呈阴性。
免疫过氧化物酶染色显示细胞角蛋白阳性。
p53基因273密码子中有一个G->突变导致Arg->His替换，309密码子中有一个C->T突变导致Pro->Ser替换。
细胞表达高水平的p53蛋白。
c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos癌基因表达阳性。
未检测到N-myc癌基因表达。
基质溶血素，一种与肿瘤侵袭性相关的金属蛋白酶，不表达。
据报道，这些细胞能产生GM-CSF。
许多SW480细胞在解冻后的头几天保持悬浮状态是正常的，并且只是松散地附着在一起。这些细胞在L-15培养基中在大气条件下培养。如果无法将培养箱专用于大气培养，则可使用带拧紧、无排气塞密封盖的组织培养瓶，以防止二氧化碳大气进入培养瓶。用新鲜培养基喂养时，这些细胞应轻拿轻放，任何漂浮的细胞应通过轻轻离心保留，并与粘附细胞一起添加回同一烧瓶中。漂浮细胞最终会附着并生长良好。将悬浮细胞丢失或将细胞分成几个烧瓶会使培养物稀释，导致生长缓慢或完全停止。 |
| 参考文献: |
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Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034
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| 细胞图片： |
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SW-480人结肠癌细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请 拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口 膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的 完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代， 传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现 污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
SW-480人结肠癌细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将 细胞悬液 加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清 液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血 清和 DMSO ，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储 存。记录冻存 管位置以便下次拿取。
SW-480人结肠癌细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子等，确保细胞培 养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶壁脱落，将细 胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证 实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确 认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇合度 80% 左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以一定比例和客户 自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell 技术 部沟通交流。由 于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问 题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
