细胞名称: | ACC-M细胞, ACCM细胞, 人涎腺癌细胞 |
---|---|
细胞又名: | Acc-M; ACCM |
种属来源: | 人 |
组织来源: | 涎腺 |
疾病特征: | 涎腺癌 |
细胞形态: | 上皮细胞样 |
生长特性: | 贴壁生长 |
培养基: | RPMI-1640,90%;FBS,10%。 |
生长条件: | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, |
传代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测: | 阴性 |
参考文献: |
1. Liu N.-N., Zhang S.-L., Chen W.
The cross-contaminated cell lines of adenoid cystic carcinoma: a crucial concern.
Transl. Surg. 2:10-13(2017)
2. Ye F., Chen C.-G., Qin J., Liu J., Zheng C.-Y.
Genetic profiling reveals an alarming rate of cross-contamination among human cell lines used in China.
FASEB J. 29:4268-4272(2015)
3. Zhao M., Sano D., Pickering C.R., Jasser S.A., Henderson Y.C., Clayman G.L., Sturgis E.M., Ow T.J., Lotan R., Carey T.E., Sacks P.G., Grandis J.R., Sidransky D., Heldin N.-E., Myers J.N.
Assembly and initial characterization of a panel of 85 genomically validated cell lines from diverse head and neck tumor sites.
Clin. Cancer Res. 17:7248-7264(2011)
4. Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I.
Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines.
Int. J. Cancer 127:1-8(2010)
5. Phuchareon J., Ohta Y., Woo J.M., Eisele D.W., Tetsu O.
Genetic profiling reveals cross-contamination and misidentification of 6 adenoid cystic carcinoma cell lines: ACC2, ACC3, ACCM, ACCNS, ACCS and CAC2.
PLoS ONE 4:E6040-E6040(2009)
|
ACC-M人涎腺癌细胞特点和简介
ACC-M细胞是ACC-2细胞系经体内外不断选择获得的肺转移细胞株(ACC-2不形成肺转移),其裸鼠体内肺转移率达96%。该细胞株除保留了上皮和腺源性的特性外,体外生长能力大大增强。已证明该细胞株是建立肺高转移性裸鼠模型的极佳材料。ACC-M人涎腺癌细胞接受后处理
1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
ACC-M人涎腺癌细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
ACC-M人涎腺癌细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。