| 出品公司: | Thermfisher |
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| 菌种名称: | OP50，线虫培养菌OP50，秀丽隐杆线虫OP50大肠杆菌, OP50大肠杆菌 |
| 菌种又名: | OP-50 |
| 菌株类型: | 大肠杆菌，Escherichia coli |
| 产品目录号: | 29021 |
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37℃, 有氧 |
| 抗性: | 无抗 |
| 生物安全等级: | 1 |
| 模式菌株: | 是 |
| 应用: |
科研，生产，主要用于饲养线虫。 OP50大肠杆菌主要用于秀丽隐杆线虫的细菌食物。 |
| 菌株特点: |
OP50是大肠杆菌, Escherichia coli。
OP50是一种大肠杆菌菌株，通常用作实验室在琼脂平板上培养秀丽隐杆线虫的细菌食物。它还被用于在微流体装置（MFDs）内的纵向培养物中喂养秀丽隐杆线虫(Hulme et al., 2010; Li et al., 2015).
OP50大肠杆菌是尿嘧啶缺陷型(Uracil auxotroph)。
OP50大肠杆菌是革兰氏阴性短杆菌，周生鞭毛，能运动，无芽孢；菌落圆形，表面光滑湿润而具闪光，微凸起，边缘整齐。 |
| 参考文献: |
Vidur Sabharwal 2019. Harvesting OP50 for C. elegans liquid culture. protocols.io https://dx.doi.org/10.17504/protocols.io.xcmfiu6
Arata Y, Oshima T, Ikeda Y, Kimura H, Sako Y. OP50, a bacterial strain conventionally used as food for laboratory maintenance of C. elegans, is a biofilm formation defective mutant. MicroPubl Biol. 2020 Feb 5;2020:10.17912/micropub.biology.000216. doi: 10.17912/micropub.biology.000216. PMID: 32550510; PMCID: PMC7252395.
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| 参考资料: |
1. OP50大肠杆菌培养方法 2. 用于线虫培养的OP50大肠杆菌培养方法 |
OP50饲养菌培养线虫方法
OP50大肠杆菌接种NGMA平板
1.首先找到您的用品：
•新鲜的OP50 LB平板（不超过2周龄）-储存在冰箱中。
•2 L烧瓶，装有500ml无菌LB。
注：这可能已经准备好了，但如果没有，可以在烧瓶中对LB进行高压灭菌。
•200毫升LB
•6cm NGMA空板
•15毫升塑料培养管
•塑料接种环
•无菌刻度5 ml移液管和移液器
•1.5 ml无菌试管
•1毫升微量移液管和尖端
•塑料试管和分光光度计
第1天：准备OP50 5 ml培养物。
2.将各5ml LB培养基放入2个塑料培养管中。一个贴上“OP50”标签，另一个贴“LB空白”标签仅“用于污染阴性对照，因为在培养基中没有抗生素选择。
3.用来自OP50菌种平板的一个菌落接种至OP50管。
4.在实验室以37ºC、225转/分的速度培养过夜（16-18小时）。
第2天：将OP50 500 ml培养物培养至OD=0.5-0.6。
5.确保对照LB管中没有菌生长，OP50中有菌生长。
6.将1ml OP50菌种加入500毫升LB培养基中，其产生约0.005的起始OD。
注：过夜培养将非常接近OD=2.5，但要验证。根据需要，通过在1毫升体积的LB中稀释5毫升培养物10X来测量OD值。使用LB空白作为阴性对照。
7.在摇床培养箱中，在37ºC、225 rpm下培养。
8.在前2.5小时后监测OD，当培养物处于OD=0.5-0.6时停止培养（通常在约4至4.5小时）。
9.将约200μl的培养物等分放入1.5 ml试管中，用于接种到测试板中。
10.立即将培养物储存在4ºC的房间里，标签上写着“OP50”但在你用线虫测试是否污染之前，不要使用这种直接使用该培养物。
11.用100μl的培养物接种于6cm的NGMA测试板（每个培养物2个）并放置在37ºC下过夜。
12.第二天，检查平板上的OP50菌苔是否正常生长。如果没有污染，在培养基烧瓶标签上注明可用。
