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King琼脂B；假单胞菌琼脂F；国王培养基B |
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King Agar B；Pseudomonas Agar F；Pseudomonas Agar for Fluorescein; King medium B |
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鉴别培养基 |
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for microbiology |
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ELITE-MEDIA（艾礼培养基） |
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M142-01、M142-02 |
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250g、500g (添加剂需另购) |
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麦秸色均一粉末。 |
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棕黄色半透明凝胶。 |
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密封，2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
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避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
King Agar A
CFC Selective Supplement |
产品描述：
King琼脂B(King Agar B)也称假单胞菌琼脂F(Pseudomonas Agar for Fluorescein)，是鉴别培养基，用于检测和计数水中的荧光细菌，特别是饮用水中的荧光假单胞菌。
工作原理
King琼脂B(King Agar B)增强荧光素的生成，抑制绿脓杆菌素形成。混合蛋白胨提供必需的氮源、碳源和硫源及微量元素。甘油作为碳水化合物来源，磷酸盐是缓冲剂。硫酸镁是荧光素合成必需的活性成分。
铜绿假单胞菌菌落周围环绕一圈黄色至黄绿色晕圈，在紫外灯下（366nm）有荧光现象，这是由于产生荧光素的缘故。如果绿脓菌素也合成了，则产生亮绿色。为了确认有率脓菌素存在，可用氯仿进行萃取。多数产绿脓菌素的假单胞菌也合成荧光素，而其它菌株只合成一种色素。对于大多数荧光素产生菌来说，培养温度是一个决定因素，应为这些菌株不能够在35°C生长，只能在25-35°C生长。非典型性绿脓菌素阴性、荧光素阳性铜绿假单胞菌菌株，也能与其它荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌区别开来。铜绿假单胞菌的鉴别可以通过接下来在麦康凯琼脂上培养，因为荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌不能在UV光线下发荧光，而且生长很差。
配方与配制方法
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成分 |
g/L |
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混合蛋白胨 |
20.0 |
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磷酸氢二钾 |
1.5 |
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硫酸镁 |
1.5 |
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琼脂 |
10.0 |
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甘油 |
10 ml |
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pH |
7.2 +/- 0.2 |
CFC选择性添加剂（CFC Selective Supplement）
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十六烷三甲基溴化铵 |
10 mg |
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梭链孢酸钠 |
10 mg |
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先锋霉素II |
50 mg |
配制方法：
1. 用990ml去离子水溶解33g本产品，加入10ml甘油。
2. 煮沸使培养基完全溶解。
3. 121°C灭菌15min。
4. 冷却至50°C，可加入CFC选择性添加剂(CFC Selective Supplement)，制备选择性培养基。
实验方法：
根据Dansk标准，制备一系列样品稀释液（稀释因子10）。每个稀释浓度吸取2个1ml溶液，采用倒平板法接种。平板在20-25 °C培养最长72h。用紫外线灯计数荧光细菌总菌落数和总微生物计数。
结果与分析
20-25°C，培养最长72h。观察培养物特征。ATCC标准菌株在King琼脂B培养基上的生长情况如下:
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Organisms (ATCC) |
菌株 |
生长情况 |
黄绿色素 |
荧光素 |
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Pseudomonas fluorescens ATCC17397 |
荧光假单胞菌 |
+++ |
+ |
+ |
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Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 |
铜绿假单胞菌 |
+++ |
+ |
+ |
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Pseudomonas aeruginosa ATCC9027 |
铜绿假单胞菌 |
+++ |
+ |
+ |
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Pseudomonas aeruginosa ATCC17397 |
铜绿假单胞菌 |
+++ |
+/- |
+/- |
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Pseudomonas cepacia ATCC25609 |
洋葱假单胞菌 |
+++ |
- |
- |
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Aeromonas hydrophila ATCC7966 |
嗜水气单胞菌 |
+++ |
- |
- |
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Escherichia coli ATCC25922 |
大肠杆菌 |
+++ |
- |
- |
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Enterobacter cloacae ATCC13047 |
阴沟肠杆菌 |
+++ |
- |
- |
