产品名称: | ATCC培养基1875;脱硫杆菌培养基;硫还原菌培养基 |
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英文名称: | Desulfobacterium medium;ATCC medium 1875 |
培养基类型: | 非选择性培养基 |
级别: | AR级 |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M810-01、M810-02 |
产品规格: | 5L Kit、10L Kit(无菌溶液,500ml/瓶) |
产品外观: | 蓝紫色透明溶液。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 淡黄色透明溶液,可能有轻微沉淀。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
ATCC Medium 1875: 脱硫杆菌培养基(Desulfobacterium medium)用于选择性培养脱硫杆菌属菌种。原理:
脱硫杆菌属是一种硫酸盐还原菌,厌氧。广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中。在无氧或极少氧情况下,硫酸盐还原菌能利用有机物作为碳源,并利用细菌生物膜内产生的氢,将硫酸盐还原成硫化氢,从氧化还原反应中获得能量。脱硫杆菌属在pH值 5-10范围内均能生长,最佳pH值为7-8。最适温度:中温菌为30-40℃;高温菌为55-60℃。
脱硫菌属对氧极其敏感,因此对其培养与分离,要采用严格的厌氧技术。不仅仅要求周围生长的环境是无氧的,培养基中氧化还原电位必须在-100mV以下。所以通常在培养基中加入一些强还原剂,如巯基乙醇、抗坏血酸、L-半胱氨酸盐酸盐、硫化钠。这些物质受热容易分解,所以要采用过滤除菌的方法单独灭菌。培养基中的硫酸钠脱硫菌的能量物质,乳酸作为碳源。二价铁盐是脱硫菌生长指示剂,表现为液体培养基变黑。
所有菌株都应该于暗处培养。
配方与配制方法
溶液A (930 ml):Na2SO4 | 3.0 g |
KH2PO4 | 0.2 g |
NH4Cl | 0.3 g |
NaCl2 | 1.0 g |
MgCl2.6H2O | 3.0 g |
KCl | 0.5 g |
CaCl2.2H2O | 0.15 g |
刃天青 | 0.001 g |
乳酸 | 0.9 g |
溶液B (1.0 ml): Trace Element Solution SL-10
HCl (25%) | 10.0 ml |
FeCl2.4H2O | 1.5 g |
ZnCl2 | 70.0 mg |
MnCl2.4H2O | 100.0 mg |
H3BO3 | 6.0 mg |
CoCl2.6H2O | 190.0 mg |
CuCl2.2H2O | 2.0 mg |
NiCl2.6H2O | 24.0 mg |
Na2MoO4.2H2O | 36.0 mg |
溶液C (50.0 ml):
NaHCO3 | 2.5 g |
溶液D(10.0 ml): Wolfe's Vitamin Solution
Biotin | 2.0 mg |
Folic acid | 2.0 mg |
Pyridoxine hydrochloride | 10.0 mg |
Thiamine . HCl | 5.0 mg |
Riboflavin | 5.0 mg |
Nicotinic acid | 5.0 mg |
Calcium D-(+)-pantothenate | 5.0 mg |
Vitamin B12 | 0.1 mg |
p-Aminobenzoic acid | 5.0 mg |
Thioctic acid | 5.0 mg |
Distilled water | 1.0 L |
溶液E(1.0 ml):
Na2SeO3.5H2O | 3.0 mg |
0.01 M NaOH | 1.0 L |
溶液F(10.0 ml):
Na2S.9H2O | 0.4 g |
用930ml去离子水溶解A,121℃高压蒸汽灭菌15min。在80%N2,20%CO2气体环境下冷却。在N2条件下灭菌溶液F。溶液B、D、E在N2环境下过滤除菌。溶液C过滤除菌,80%N2,20%CO2气体环境下平衡20min。按照B至F的顺序依次将上述溶液加入到冷却后的A中。检查培养基最终pH是否为7.0。
加入新鲜配制的过滤除菌的10-20 mg/L连二亚硫酸钠(Na2S2O4)溶液,在起始阶段能够刺激所有菌株的生长。