| 细胞名称: | HEI-OC1细胞, HEIOC1细胞, 耳蜗毛细胞株, 听神经细胞株, 助听细胞株, House Ear Institute-Organ of Corti 1 |
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| 细胞又名: | HEIOC1; House Ear Institute-Organ of Corti 1 |
| 出品公司 | ExPASY |
| 编号 | CVCL_D899 |
| 细胞文献书写 | To cite this cell line use: HEI-OC1 (RRID:CVCL_D899) |
| 细胞株来源 | 豪斯耳科学院 House Ear Institute |
| 种属来源: | 小鼠 |
| 组织来源: | 耳蜗螺旋器 |
| 疾病特征: | 正常 |
| 用途 | 各种药物对于听力细胞毒性毒理学检测。 |
| 说明 | 细胞生长条件是33度时，细胞会出现快速增值和去分化现象。生长条件是39度时，细胞增殖出现停止48h，同时诱导细胞出现分化。 |
| 细胞形态: | 上皮细胞样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 培养基: | DMEM培养基，90%；FBS，10%。二氧化碳10%，33度培养。 |
| 生长条件: | 气相：空气，90%；二氧化碳，10%; 温度：33 ℃, |
| 传代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 冻存条件: | 90% FBS+10% DMSO，液氮储存 |
| 支原体检测: | 阴性 |
| 参考文献 |
1. Kalinec G.M., Webster P., Lim D.J., Kalinec F.
A cochlear cell line as an in vitro system for drug ototoxicity screening.
Audiol. Neurootol. 8:177-189(2003)
2. Park C., Thein P., Kalinec G.M., Kalinec F.
HEI-OC1 cells as a model for investigating prestin function.
Hear. Res. 335:9-17(2016)
3. Kalinec G.M., Thein P., Park C., Kalinec F.
HEI-OC1 cells as a model for investigating drug cytotoxicity.
Hear. Res. 335:105-117(2016)
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HEI-OC1耳蜗毛细胞特点和简介
HEI-OC1是为数不多的用于研究目的的小鼠听觉细胞系之一。这些细胞最初被认为是一种用于筛选耳毒性药物的体外系统，已被用于研究药物激活的凋亡途径、自噬、衰老、细胞保护机制、炎症反应、细胞分化、药物的遗传和表观遗传效应、缺氧、氧化和内皮细胞的作用，耳蜗中分子通道和受体的表达。在耳蜗毛细胞的其他几个重要标志物中，HEI-OC1细胞在耳蜗毛细胞内表达Prestin蛋白，这是外毛细胞的典型运动蛋白。因此，HEIOC1细胞对于阐明这种重要听觉蛋白的新功能和作用机理方面非常有用。HEI-OC1细胞非常健壮，其培养通常不会出现大的并发症。但是，它们需要一些特殊的条件，例如避免使用含有链霉素或其他抗生素，以及在33°C下孵育以刺激细胞增殖，在39°C下孵育以触发细胞分化。HEI-OC1耳蜗毛细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
HEI-OC1细胞听神经细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入 约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显 微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培 养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止 消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度 为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
HEI-OC1耳蜗毛细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一 致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养 箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力 正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们 为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正 常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培 养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原 因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
