| 细胞名称: | SNU-354细胞, SNU354细胞, 肝细胞癌 |
|---|---|
| 细胞又名: | SNU354 |
| 细胞来源: | KCLB |
| 产品货号: | 00354 |
| 种属来源: | 人 |
| 组织来源: | 肝 |
| 患者性别: | 男 |
| 患者年龄: | 52 |
| 异常基因: | HBX |
| 病毒: | HBV |
| 细胞形态: | 多边形 |
| 组织病理学: | 原发性肝癌 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 培养基: | RPMI1640(含 L-谷氨酰胺(300mg/L), 25mM HEPES和25mM NaHCO3）, 90%; FBS, 10%。 |
| 生长条件: | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, |
| 传代方法: | 1：4，每周2次。 |
| 冻存条件: | RPMI1640, 52.5%; FBS, 40%; DMSO, 7.5%，液氮储存 |
| STR: |
Amelogenin X,Y
CSF1PO 8,11
D3S1358 15,17
D5S818 11,12
D7S820 7,11
D13S317 10,11
FGA 21,22
TH01 9
TPOX 11
vWA 17
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| 支原体检测: | 荧光法（-） |
| 参考文献: |
1.Park S.-J., Jeong S.-Y., Kim H.J.
Y chromosome loss and other genomic alterations in hepatocellular carcinoma cell lines analyzed by CGH and CGH array.
Cancer Genet. Cytogenet. 166:56-64(2006)
2.Ku J.-L., Park J.-G.
Biology of SNU cell lines.
Cancer Res. Treat. 37:1-19(2005)
3.Kang M.-S., Lee H.-J., Lee J.-H., Ku J.-L., Lee K.P., Kelley M.J., Won Y.-J., Kim S.-T., Park J.-G.
Mutation of p53 gene in hepatocellular carcinoma cell lines with HBX DNA.
Int. J. Cancer 67:898-902(1996)
4.Park J.-G., Lee J.-H., Kang M.-S., Park K.-J., Jeon Y.-M., Lee H.-J., Kwon H.-S., Park H.-S., Yeo K.-S., Lee K.-U., Kim S.-T., Chung J.-K., Hwang Y.-J., Lee H.-S., Kim C.Y., Lee Y.I., Chen T.-R., Hay R.J., Song S.-Y., Kim W.-H., Ki C.-W., Kim Y.-I.
Characterization of cell lines established from human hepatocellular carcinoma.
Int. J. Cancer 62:276-282(1995)
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SNU-354肝细胞癌接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
5) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
SNU-354肝细胞癌培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 5mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 5 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
5. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 5 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
SNU-354肝细胞癌培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 5~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
5. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
