产品名称: | 碱性蛋白胨水;APW培养基 |
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英文名称: | Alkaline Peptone Water;APW |
培养基类型: | 营养培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA |
产品目录号: | M743-01、M743-02 |
产品规格: | 250g、500g |
产品外观: | 乳白色至黄色均一粉末。 |
颜色与澄清度: | 浅黄色透明液体,无任何沉淀。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。 |
注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。 |
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产品描述:
碱性蛋白胨水(Alkaline Peptone Water)简称APW培养基,是霍乱弧菌和其它弧菌的增菌培养基,用于富集食品、水和临床样本中的弧菌。本产品采用《细菌学分析手册》和FDA规定配方。
工作原理
霍乱弧菌是引起霍乱疫情的成因。霍乱毒素(CT)是该菌的首要毒性因子。大多数从食品和环境中分离到的霍乱弧菌菌株不具有产毒能力,因此不是烈性的。多种生物化学特性和抗原性被作为该菌种的特征。摄入未经加热处理的海鲜引起的腹泻常常伴随拟态弧菌。分离弧菌应该做CT试验或检测CTX基因。经过富集后,筛选和验证该毒素可以用小鼠Y-1肾上腺细胞测定法和免疫测定法。碱性蛋白胨水最初作为非选择性气单孢菌属培养基。Cruickshank报导:如果提高pH值,该培养基可以有效地培养弧菌属。10%的氯化钠可以促进霍乱弧菌的生长。碱性条件能够抑制背景杂菌的生长。
用途:
碱性蛋白胨水被APHA推荐用于增菌海鲜和临床样本中的弧菌。碱性蛋白胨水也可直接用于弧菌的镜检。
配方与配制方法
成分 | 含量/L |
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动物组织胃酶水解物 | 10.0 g |
氯化钠 | 10.0 g |
pH | 8.5 ± 0.2 |
配制方法:
1. 称取20g本品,加入1000ml去离子水溶解。
2. 分装1到螺口盖试管中。
3. 121°C灭菌10min。
实验方法
弧菌的分离方法有多种,这些方法基本都涉及预增菌,然后接种到固体平板上,做形态学、生物化学和血清学鉴定。很多培养基被用作弧菌增菌培养基,但是这些培养基中仅碱性蛋白胨水被广泛采用。临床样本
拭子样本直接接种到碱性蛋白胨水中。其它样本可以用接种环转移到该培养基中。对于粪便样本,转移约1g样本到培养基中个,混匀。35-37°C培养5-6h。或者18-20°C培养18-20h。
食品和水样本
参见APHA、FDA和ISO规定方法。
不管采用哪种方法,所有的平板培养基都应该过夜培养,然后检查典型菌落特征。
1. 十二烷基硫酸钠(SDS)多粘菌素B蔗糖培养基(Sodium Dodecyl Sulphate Polymixin B Sucrose Medium):蔗糖阳性的霍乱弧菌和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus )菌落呈黄色。蔗糖阴性菌种如副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)产生蓝绿色菌落。能够产生硫酸酯酶的菌种如创伤弧菌通常还会伴有沉淀晕轮。
2. 霍乱培养基TCBS:蔗糖阳性弧菌如霍乱弧菌和溶藻弧菌形成黄色菌落。蔗糖阴性菌种如副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)产生蓝绿色菌落。
3. 麦康凯琼脂:乳糖阴性弧菌产生无色菌落。
生物化学验证试验:弧菌是过氧化氢酶阳性,发酵葡萄糖产酸不产气的微生物。在TCBS培养基上不能进行过氧化氢酶,因为该培养基中含糖,会导致结果假阴性。
结果与分析
标准菌株 ATCC编号 生长结果
副溶血性弧菌 Vibrio parahaemolyticus ATCC17802 浓密生长
创伤弧菌 Vibrio vulnificus ATCC29307 浓密生长
弗尼斯(氏)弧菌 Vibrio furnissii ATCC11218 浓密生长