| 产品名称： | 运动甲烷微菌培养基 |
|---|---|
| 英文名称: | Methanomicrobium mobile Medium |
| 培养基类型: | 营养培养基 |
| 级别: | AR级 |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 产品目录号: | M807-01、M807-02 |
| 产品规格: | 5L Kit；10L Kit |
| 保存条件: |
粉末固体：密封，阴凉干燥处保存。 液体：于2-8°C避光保存。 |
| 产品性状: |
乳白色颗粒性粉末，易结块。 灭菌后培养基：淡黄色透明液体。 |
| 注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。 |
| 相关产品: |
Wolfes矿物质溶液 Wolfes维生素溶液 |
产品描述：
运动甲烷微菌培养基(Methanomicrobium mobile Medium)用于分离和培养运动甲烷微菌属细菌。原理：
甲烷微菌属是短、弯杆菌，直径0.7μm，长1.5～2μ m，不产芽孢，革兰氏阴性，能运动，极端严格厌氧。甲烷微菌属最适生长温度40℃，最适pH 6.1～6.9。能量代谢来源于以H2或甲酸盐为电子供体还原 CO2为CH4释放的能量。甲烷微菌不能利用乙酸、甲基胺和甲醇。能够以氨为唯一氮源，以硫化物或单质硫为硫源，要求瘤胃液中的生长因子(包括乙酸、异丁酸、异戊酸、2-甲基丁酸、色氨酸、吡哆醇、硫胺素、生物素和维生素B12)。模式菌种是运动甲烷微菌(Methanomicrobium mobile)。配方与配制方法
| 瘤胃液（澄清） | 300.0 ml |
| 磷酸氢二钾 | 0.3 g |
| 磷酸二氢钾 | 0.3 g |
| 硫酸铵 | 0.3 g |
| 氯化钠 | 0.6 g |
| 硫酸镁（七水） | 0.13 g |
| 氯化钙（二水） | 8.0 mg |
| 1000X Wolfes矿物质溶液 | 1.0 ml |
| 1000X Wolfes维生素溶液 | 1.0 ml |
| 硫酸亚铁（七水） | 2.0 mg |
| 碳酸氢钠 | 2.0 g |
| 酵母提取物 | 1.0 g |
| 酪蛋白胨 | 1.0 g |
| 脂肪酸混合物 | 20.0 ml |
| 刃天青 | 1.0 mg |
| L-半胱氨酸盐酸盐 | 0.5 g |
| 硫化钠（九水） | 0.5 g |
| pH 6.5 |
称取3.641g培养基基础（不含碳酸氢钠、半胱氨酸盐酸盐、硫化钠），用680ml去离子水溶解。加入300ml澄清瘤胃液。调节pH至6.5。煮沸5-10s，然后在H2-CO2 (80:20, v/v)条件下冷却。加入碳酸氢钠到培养基中。在H2-CO2 (80:20, v/v)条件下分装到合适的容器中，如分装20ml到120ml血清瓶中。用丁基橡胶塞封住瓶口。121°C 灭菌15 min。灭菌结束后过夜静止。
在N2环境下，分别灭菌5%半胱氨酸盐酸盐溶液和5%九水硫化钠溶液。在接种前加入两种还原剂溶液。向接种后的培养瓶中用H2-CO2 (80:20, v/v)加压至200kPa。
预先加热瘤胃内容物121℃灭菌15min。用无菌离心瓶在25,000 x g 离心15min。取上清液。整个过程在无菌条件下进行。调节pH至6.5。
脂肪酸混合物配方:
| 戊酸 | 0.5 g |
| 异戊酸 | 0.5 g |
| a-甲基丁酸 | 0.5 g |
| 异丁酸 | 0.5 g |
| 去离子水 | 20.0 ml |
用5M NaOH 调节pH至7.5。
1000X Wolfes矿物质溶液(Wolfe's Mineral Solution):
向大约500ml蒸馏水中加入氨三乙酸，用KOH调节pH至6.5，以使氨三乙酸完全溶解。用蒸馏水定容至1L。一次性加入其余成分。搅拌至完全溶解。过滤除菌。
1000X Wolfes维生素溶液:
