产品名称: | Rogosa琼脂;乳酸杆菌选择性琼脂;LBS琼脂 |
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英文名称: | Rogosa Agar;LBS Agar;Lactobacillus Selective Agar |
培养基类型: | 选择性培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M269-01、M269-02 |
产品规格: | 250g、500g(添加剂需另购) |
产品外观: | 麦秸色粉末,易结块。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 琥珀色半透明凝胶。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
Rogosa琼脂(Rogosa Agar)也称乳酸杆菌选择性琼脂(Lactobacillus Selective Agar)或LBS琼脂,是一种乳酸菌选择性培养基,用于分离和计数口腔和肠内菌群以及牛奶和肉类等食品中乳酸杆菌
工作原理
乳杆菌是长、细杆状细菌,不产芽孢,革兰氏阳性,一般为兼性厌氧型。大多数乳杆菌在氧分压减小、二氧化碳提高的条件下生长良好。乳酸菌是重要的奶制品工业微生物。乳杆菌在食品工业中用于发酵泡菜。果汁的腐败多是嗜酸微生物如乳酸菌和酵母菌造成的。短乳杆菌是啤酒生产过程中的污染微生物,造成啤酒的变质。这些污染了乳杆菌的啤酒浑浊度增加。乳杆菌代谢产生的双乙酰是一种强烈气味的产物,使得啤酒风味改变。LBS琼脂是一种有效的乳杆菌选择性培养基。高浓度乙酸盐和低pH抑制许多其它乳酸菌的生长。如果调节pH至6.2,则该培养基的选择性降低,可以分离全部乳酸菌。西鱼肉杆菌(Lactobacillus carnis)不能在LBS琼脂培养基上生长。
胰蛋白胨提供氮源。酵母提取物作为维生素来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。乙酸钠和柠檬酸铵是选择剂,同时也是能量物质。乙酸钠对革兰氏阴性细菌和霉菌有抑制作用,但对乳酸杆菌无影响。硫酸镁、硫酸锰和硫酸亚铁提供代谢必需的离子。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳杆菌对脂肪酸的利用。
配方与配制方法
成分 | g/L |
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蛋白胨 | 10 |
酵母提取物 | 5 |
D-葡萄糖 | 20 |
磷酸氢二钾 | 6 |
三水乙酸钠 | 15 |
柠檬酸三铵 | 2 |
硫酸镁 | 0.575 |
硫酸锰 | 0.12 |
硫酸亚铁 | 0.034 |
琼脂 | 15 |
司班80或吐温80 | 1 |
终溶液pH | 5.5± 0.2 |
配制方法:
1. 称取74g本品,加入1L去离子水,加热搅拌至完全溶解。
2. 加入1.32ml冰醋酸调节pH至5.5。
3. 加热90-100°C,2-3min。不要高温蒸汽灭菌。倒平板。
实验方法
分离乳杆菌时,推荐在35°C培养3天,或者30°C培养5天。乳杆菌偏爱微需氧环境,然而如果缺少合适的容器,倒入上层琼脂也能满足要求。嗜热乳酸细菌在42°C培养48h。疑似的嗜冷菌应该在30°C培养2天,然后在22°C继续培养1天。从肉中分离明串珠菌时,在25°C培养3天。
结果与分析
培养结束后,长势良好的菌落可能是乳酸菌。然而肠球菌和足球菌生长速度减慢,某些明串珠菌在25°C培养时产生粘液。乳酸菌菌落特征:小;灰白色;扁平或凸起;光滑、粗糙或居中。乳杆菌和其它乳酸菌菌落直径0.5-2.5mm,肠球菌菌落直径0.5-1.0mm,在室温下延长培养时间,非乳酸细菌菌落直径>2.5mm。
所有长出的菌落都应该先经过革兰氏染色和过氧化酶试验,再进行鉴定实验。
ATCC标准菌株在Rogosa琼脂平板上的生长情况如下:
ATCC标准菌株 生长情况 Lactobacillus gasseri (ATCC19992) +++ Lactbacillus acidophilus (ATCC4356) +++ Lactbacillus plantarium (ATCC8014) +++ Lactbacillus casei (ATCC9595) +++ Bifidobacteria bifidum (ATCC11863) +++ (厌氧) Enterococcus faecalis (ATCC29212) - Proteus vulgaris (ATCC13315) - Staphylococcus aureus (ATCC25923) -