| 产品名称： | ATCC培养基1136；甲烷杆菌培养基 |
|---|---|
| 英文名称： | ATCC Medium 1136；Methanobacteria medium |
| 级别： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 产品目录号： | M1408-01、M1408-02 |
| 产品规格： | 5L Kit、20L Kit |
| 产品外观： | 蓝紫色溶液。 |
| 颜色与澄清度： | 脱氧还原后为淡黄色透明溶液。 |
| 保存条件： | 密封，避光，2-8°C保存。 |
| 注意事项： | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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改良Wolfe矿物质溶液 Wolfe维生素溶液 |
产品描述：
ATCC medium 1136:甲烷杆菌培养基(Methanobacteria medium)用于培养甲烷杆菌。1136是在1045的基础上增加了0.1%酵母提取物和50 mM乳酸钠和100 mM甲醇。配方与配制方法：
| 成分 | 含量 |
| 酵母提取物 | 1 g |
| 乳酸钠 | 5.6 g（60%溶液9.3ml） |
| 甲醇 | 4 ml |
| 刃天青 | 0.001 g |
| 矿物盐溶液2 | 50 ml |
| 矿物盐溶液1 | 25 ml |
| 8.0% Na2CO3溶液 | 50 ml |
| Wolfe矿物盐溶液 | 10 ml |
| Wolfe维生素溶液 | 10 ml |
| 还原剂溶液 | 20 ml |
| pH 7.2 |
配制方法：
用822ml蒸馏水溶解以上成分(维生素、还原剂、甲醇除外)。如果配制固体培养基，加入20g琼脂。121℃高温蒸汽灭菌15min。然后在80% N2、20% CO2条件下冷却，脱氧还原（溶液颜色的红色消失，显出本身的淡黄色）。加入wolfe维生素溶液（过滤除菌）、甲醇（过滤除菌）和半胱氨酸/硫化钠还原剂。调节pH至7.2。在相同的厌氧环境下分装到厌氧试管中。
矿物盐溶液 1:
| K2HPO4 | 6.0 g |
| 蒸馏水 | 1.0 L |
矿物盐溶液 2:
| KH2PO4 | 6.0 g |
| (NH4)2SO4 | 6.0 g |
| NaCl | 12.0 g |
| MgSO4 . 7H2O | 2.4 g |
| CaCl2 . 2H2O | 1.6 g |
| 蒸馏水 | 1.0 L |
8%Na2CO3溶液:
| Na2CO3 | 8.0 g |
| 蒸馏水 | 100.0 ml |
还原剂(Reducing Agent)
分别称取300mgL-半胱氨酸盐酸盐和300mg Na2S . 9H2O，并分别用10ml水溶解。在N2条件下装入管中。121℃高温蒸汽灭菌15min。然后快速排气冷却。在N2条件下混合两种溶液。混合后的溶液至少可以保存2周。
改良Wolfe矿物质溶液
| 氨三乙酸 | 1.5 g |
| MgSO4 . 7H2O | 3.0 g |
| MnSO4 . H2O | 0.5 g |
| NaCl | 1.0 g |
| FeSO4 . 7H2O | 0.1 g |
| CoCl2 . 6H2O | 0.1 g |
| CaCl2 | 0.1 g |
| ZnSO4 . 7H2O | 0.1 g |
| CuSO4 . 5H2O | 0.01 g |
| AlK(SO4)2 . 12H2O | 0.01 g |
| H3BO3 | 0.01 g |
| Na2MoO4 . 2H2O | 0.01 g |
| 蒸馏水 | 1.0 L |
用500ml蒸馏水溶解氨三乙酸，用KOH调节pH至6.5，使氨三乙酸完全溶解。然后定容至1L。加入余下成分。过滤除菌。
Wolfe维生素溶液
| Biotin | 2.0 mg |
| Folic acid | 2.0 mg |
| Pyridoxine hydrochloride | 10.0 mg |
| Thiamine . HCl | 5.0 mg |
| Riboflavin | 5.0 mg |
| Nicotinic acid | 5.0 mg |
| Calcium D-(+)-pantothenate | 5.0 mg |
| Vitamin B12 | 0.1 mg |
| p-Aminobenzoic acid | 5.0 mg |
| Thioctic acid | 5.0 mg |
| 蒸馏水 | 1.0 L |
