产品名称: | 蜡状芽孢杆菌选择性琼脂;BCSA培养基;芽孢杆菌琼脂 |
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英文名称: | Bacillus Cereus Selective Agar;BCSA;Bacillus Cereus Agar |
培养基类型: | 选择与鉴别培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M757-01、M757-02 |
产品规格: | 250g、500g(50%卵黄乳液、多粘菌素B另售) |
产品外观: | 米色至浅绿色均一粉末。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 加入卵黄乳液后为黄绿色不透明凝胶。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
蜡状芽孢杆菌选择性琼脂(Bacillus Cereus Selective Agar)简称BCSA培养基,是选择和鉴别培养基,用于增菌和分离食品中的蜡状芽孢杆菌。蜡状芽孢杆菌引发的食物中毒常用污染的大米有关。该微生物还涉及到眼部感染、脓肿形成、脑膜炎、败血病和伤口感染。蜡状芽孢杆菌被认为是整形手术术后感染的重要病原菌。对于兽医来说,蜡状芽孢杆菌是常见的致病菌,特别是母羊和小母牛的乳腺炎的病原菌。
蜡状芽孢杆菌选择性琼脂具有高度的专一性,该培养基上的蜡状芽孢杆菌菌落可直接鉴定或者用镜检验证。蜡状芽孢杆菌选择性琼脂由高度选择性和专一性的PEMBA培养基衍生而来。
工作原理
0.1%蛋白胨和丙酸钠可以改善卵黄的沉淀,增加芽孢的产生。硫酸镁提供二价离子,作为蜡状芽孢杆菌重要的生长因子。溴甲酚蓝是酸碱指示剂,用于检测甘露醇利用情况。溴甲酚蓝变色范围pH3.8(黄色)~5.4(蓝绿色)。能够发酵甘露醇的微生物如金黄色葡萄球菌,发酵甘露醇产酸,使培养基pH降低,颜色由蓝绿色变黄色。蜡状芽孢杆菌不能发酵甘露醇,培养基不变色。多粘菌素B抑制革兰式阴性杆菌生长。如果待测样本中含有大量霉菌,向培养基中加入40 mg/L环己酰亚胺(放线菌酮)抑制霉菌生长。卵黄乳液用于检测卵磷脂酶活性。蜡状芽孢杆菌能够分泌卵磷脂酶,卵磷脂酶水解卵黄中的卵磷脂,产生白色沉淀,使得菌落周围有白色不透明沉淀带。该特征可以将蜡状芽孢杆菌与其它芽孢杆菌区别开来,除了苏云金芽孢杆菌。另外,沉淀反应出现时间比较早,一般在耐多粘菌素B微生物菌落出现之前即可辨认。在该培养基上培养的蜡状芽孢杆菌在显微镜下观察时,营养细胞内有脂质体,其它芽孢杆菌不具有该特征。该检测方法被推荐作为快速验证方法,替代生物化学验证方法。
用途:
蜡状芽孢杆菌选择性琼脂用于增菌、分离和鉴定食品中的蜡状芽孢杆菌。配方与配制方法
成分 | 含量 |
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丙酸钠 | 10.0 g |
磷酸氢二钠 | 2.5 g |
胃蛋白胨 | 1.0 g |
甘露醇 | 10.0 g |
氯化钠 | 2.0 g |
磷酸二氢钾 | 0.25 g |
溴甲酚蓝 | 0.12 g |
硫酸镁 | 0.1 g |
琼脂 | 15.0 g |
50% 卵黄乳液 | 100 ml |
10mg/ml 多粘菌素B | 1 ml |
最终pH | 7.2 ± 0.2 |
配制方法:
1. 称取41.0g本产品,加900ml去离子水,加热使其溶解。
2. 121°C灭菌15min。
3. 冷却至45-50°C时加入1ml 多粘菌素B 和100ml预热的 50%卵黄乳液。混匀后倒平板。
实验方法
1. Homogenise 10g of the food sample for 30 seconds in 90ml of 0.1% Peptone Water. Dried foods should first be rehydrated by soaking 20g in 90ml of tryptone salt solution for 50 minutes at room temperature. Add a further 90ml of 0.1% peptone 2. water to give a final dilution of 10-1. Homogenise for 30 seconds.2. Further dilutions of the homogenate should be made in 0.1% peptone water.
3. Inoculate 0.1ml amounts of the 10-1 and higher dilutions on to the surface of the medium.
4. Incubate the plates at 37°C for 24 hours.
5. Examine for typical colonies of Bacillus cereus.
6. If no initial colonies were seen at 24 hours, re-incubate the plates for a further 24 hours at 37°C.
7. Confirm the presumptive identification of Bacillus cereus by the Rapid Confirmatory Staining Procedure.
8. Report the results as the number of Bacillus cereus colonies per gram weight of the food sample.
结果与分析
蜡状芽孢杆菌菌落形态如图1。枯草芽孢杆菌菌落形态如图2。