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ECD琼脂；大肠杆菌直接琼脂 |
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ECD Agar；E.coli Direct Agar |
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选择与鉴别培养基 |
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for microbiology |
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ELITE-MEDIA（艾礼培养基） |
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M152-01、M152-02 |
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250g、500g（添加剂需另购） |
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麦秸色均一粉末。 |
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黄褐色透明至微不透明凝胶。 |
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密封，2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
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避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述：
大肠杆菌直接琼脂(E.coli Direct Agar)简称ECD琼脂，是大肠杆菌选择与鉴别培养基，用于滤膜法检测水、食品和其它材料中的大肠菌和大肠杆菌。ECD琼脂用于检验肉类食品中的大肠杆菌。
工作原理
酪蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和其它营养成分。因为酪蛋白是胰蛋白酶水解的，因此可以做吲哚反应试验。胆盐抑制革兰氏阳性菌，尤其是杆菌和粪链球菌。氯化钠维持培养基渗透压。磷酸盐是缓冲剂。虽然该配方是完全配方，可以加入5 g/l乳糖或者葡萄糖作为可发酵糖类。加入碳水化合物能够改善大肠菌和大肠杆菌生长。
配方与配制方法
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组分 |
g/L |
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酪蛋白胨 |
20.0 |
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酵母提取物 |
5.0 |
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胆盐 |
1.5 |
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磷酸氢二钠 |
5.0 |
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磷酸二氢钾 |
1.5 |
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氯化钠 |
5.0 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH |
7.2 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 称取53g本产品，用1L去离子水重悬。可以加入100mg MUG。
2. 121°C灭菌15 min。
3. 冷却至45-50°C，混合均匀，倒平板或分装到试管中。
实验方法
大肠杆菌合成beta-D-葡萄糖醛酸酶裂解MUG，产生荧光化合物，可以用紫外灯检测。可以在该培养基上进行吲哚试验以进一步验证。向菌落表面加10-20 µl Kovac吲哚试剂，在2-10s内颜色变红色证明有吲哚生成。
结果与分析
44.5°C，培养24h，标准菌株在ECD琼脂中生长情况如下：
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Organisms (ATCC) |
生长情况 |
荧光 |
吲哚反应 |
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Escherichia coli (25922) |
+++ |
+ (MUG) |
+ |
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Klebsiella pneumoniae (13883) |
+++ |
- |
- |
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Proteus mirabilis (14153) |
+++ |
- |
- |
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Pseudomonas aeruginosa (27853) |
+++ |
+ |
- |
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Citrobacter freundii (8090) |
+++ |
- |
- |
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Enterobacter aerogenes (13048) |
+++ |
- |
- |
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Clostridium perfringens (10543) |
-/+ |
(+) |
- |
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Bacillus cereus (11778) |
- |
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Streptococcus pyogenes (19615) |
- |
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Staphylococcus aureus (6538) |
- |
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