产品名称: | 动力硝酸盐培养基 |
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英文名称: | Motility Nitrate Medium |
培养基类型: | 鉴别培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M145-01、M145-02、M145-03 |
产品规格: | 250g、500g (甘油需另购)、20支/盒(无菌即用型试管) |
产品外观: | 麦秸色均一粉末。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 浅琥珀色透明凝胶。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
动力硝酸盐培养基(Motility Nitrate Medium)用于鉴定能运动的、硝酸盐利用型微生物,如铜绿假单胞菌、产气梭状芽孢杆菌。工作原理
动力硝酸盐培养基是根据FDA和APHA规定配制。ISO委员会推荐微小改动的动力硝酸盐培养基。明胶蛋白胨、肉浸粉和半乳糖提供必要的生长所需营养。硝酸盐是硝酸盐还原反应的底物。减量的琼脂使培养基呈半固体,以检测运动性。从含有刃天青的巯基乙酸盐肉汤(Thioglycolate Broth)或TSC琼脂上获得的纯培养物,穿刺接种到动力硝酸盐培养基中。35°C培养24-48 h。硝酸盐还原反应不是确认试验。完全鉴定应该包括形态特征、革兰氏反应、生化和血清试验。配方与配制方法
成分 | g/L |
肉浸粉 | 3.0 |
明胶蛋白胨 | 5.0 |
硝酸钾 | 5.0 |
磷酸氢二钠 | 2.5 |
半乳糖 | 5.0 |
琼脂 | 3.0 |
甘油 | 5 ml |
Final pH | 7.4 ± 0.2 |
配制方法:
1. 称取23.5g本产品,用1L去离子水重悬,加入5ml甘油。
2. 分装到螺旋盖试管中,121°C灭菌15 min。
3. 用流动冷水使培养基降温,然后以直立状态凝固。
实验方法:
硝酸盐试验成功的硝酸盐还原试验基于正确的实验条件。这意味着微生物需要精确的培养基,正确的温度和厌氧环境。硝酸盐还原只发生在厌氧条件下。要达到厌氧条件,推荐用过量的二氧化碳填充试管,并用石蜡油密封。或在厌氧罐中培养。35°C培养24-48 h。
加入5滴试剂A和5滴试剂B到含有培养物的试管中,在几分钟内就会出现明显的红色和粉色,表明硝酸盐被还原。如果培养基在加锌粉前变粉红色,证明阳性反应,试验结束。如果无色,加入微量(刀尖大小)锌粉,在室温下放置10-15min。如果培养基仍然无色,说明结果是阳性的。如果加入锌粉后培养基变粉色,结果是阴性的。阴性结果也应该被检测。加入过多的锌粉会造成阴性结果。
对氨基苯磺酸溶液(Reagent A):称取8 g对氨基苯磺酸,溶解到1L的5N乙酸中。试剂A可以在室温下避光保存长达3个月。
α-萘胺溶液(Reagent B):溶解6 g α-萘胺到1L的5N乙酸中。试剂B在2-8°C,暗处保存最长3个月。