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改良m肠球菌琼脂；改良滤膜法肠球菌琼脂 |
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M Enterococcus Agar, modified；Membrane filter Enterococcus Agar, modified |
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选择性培养基 |
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for microbiology |
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ELITE-MEDIA |
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M183-01、M183-02 |
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250g、500g 选择性添加剂需另购 |
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密封，2-25°干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
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麦秸色粉末。 |
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淡黄褐色透明凝胶。 |
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避免摄入、呼入、皮肤接触。 |
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七叶苷铁琼脂 |
产品描述：
改良m肠球菌琼脂(M Enterococcus Agar, modified)即改良滤膜法肠球菌琼脂(Membrane filter Enterococcus Agar, modified)是肠球菌选择性培养基。
工作原理
改良m肠球菌琼脂培养基中含有明胶蛋白胨和酵母提取物，提供链球菌生长必需的生长营养物质，如氨基酸、碳源、维生素和矿物质。氯化钠维持培养基的等渗条件，也提供重要的离子。葡萄糖和蔗糖是可发酵碳水化合物来源。叠氮钠、放线菌酮和萘啶酸是抑制剂。叠氮钠抑制大多数革兰氏阴性厌氧菌生长。萘啶酸抑制革兰氏阴性杆菌生长。放线菌酮抑制真菌生长。肠球菌能够水解七叶苷为七叶苷原和葡萄糖。七叶苷原与柠檬酸铁反应生成棕黑色沉淀沉积在菌落周围。TTC被肠球菌还原生成不溶性的甲臜，留在细菌细胞内，给予菌落以红色。
应用
在游泳池水中肠球菌密度与胃肠炎有对应关系，因此USEPA规定用改良m肠球菌琼脂来计数和鉴别游泳池水中的肠球菌。该培养基在检测和定量各种类型的水中的肠球菌中也十分有用。
根据Slanetz和Bartley (1957)方法，改良m肠球菌琼脂应用于滤膜技术检测和计数水中和污水中的肠球菌。
改良m肠球菌琼脂也用于直接法检测食品，根据Burkwall和Hartman (1964)方法。
配方与配制方法
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组分 |
g/L |
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明胶蛋白胨 |
10.0 |
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酵母提取物 |
30.0 |
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氯化钠 |
15.0 |
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七叶苷 |
1.0 |
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叠氮钠 |
0.15 |
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琼脂 |
15.0 |
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Final pH |
7.1±0.2 |
选择性添加剂
配制方法：
1. 称取71.4 g本产品，用1000ml去离子水重悬。
2. 不断搅拌，加热使培养基完全溶。
3. 121°C高温蒸汽灭菌15min。
4. 冷却至45-50°C，加入选择性添加剂1瓶，加入15ml 无菌1% TTC溶液。混匀后倒入无菌培养皿中。
实验方法：
在滤膜法流程中，两种培养基被确立用于计数和鉴别肠球菌。其中改良m肠球菌琼脂作为选择性培养基，而七叶苷铁琼脂用于确认肠球菌的鉴定，基于该微生物水解七叶苷的能力。起初，过滤水的滤膜放置在改良m肠球菌琼脂平板上，在41°C培养48 h。培养后的滤膜转移到七叶苷铁琼脂平板上，41°C继续培养20min。
结果与分析
40-42°C培养48h，ATCC标准菌株在改良m肠球菌琼脂上的生长情况如下:
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Organisms (ATCC) |
生长情况 |
菌落颜色 |
七叶苷水解 |
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Entreococcus faecalis ATCC11700 |
+++ |
粉色至深红色 |
+ |
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Escherichia coli ATCC25922 |
- |
- |
- |
