产品名称: | 滤膜法乳糖葡萄糖醛酸苷琼脂;MLGA培养基;m月桂基硫酸盐显示琼脂 |
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英文名称: | Membrane Lactose Glucuronide Agar;MLGA;M-Lauryl Sulfate Chromogen Agar |
培养基类型: | 选择与鉴别培养基、显色培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M335-01、M335-02 |
产品规格: | 88g、250g(添加剂需另购) |
产品外观: | 粉色均一粉末。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 粉红色半透明凝胶。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制好的培养基可以在4℃保存1周。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
滤膜法乳糖葡萄糖醛酸苷琼脂(Membrane Lactose Glucuronide Agar)即MLGA培养基,是一种显色培养基,用于快速鉴别和计数水和其它材料中的大肠杆菌和其它大肠菌。该培养基简化了大肠杆菌和大肠菌的滤膜技术,将两步过滤减少为一步,并且无需进一步的验证步骤。MLGA培养基被英国环境署《饮用水微生物学》(2002)所引用,用于分离和计数大肠菌和大肠杆菌(包括O157:H7)。原理:
蛋白胨和酵母提取物提供氨基酸、维生素和其它化合物。月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌。丙酮酸钠有能够起到保护受损细胞的作用,帮助大肠菌的活化和生长。乳糖是可被大肠菌发酵的糖类,通过β-半乳糖苷酶水解,产生的酸使酚红指示剂变黄色(菌落呈黄色)。X-Gluc是一种显色底物,能被大肠杆菌产生的β-葡萄糖醛酸苷酶裂解,结果是产生蓝色菌落,再与乳糖发酵产酸结合,最终表现为绿色菌落。一般来说,由于绿色菌落是大肠杆菌的专一性很高,无需进一步验证。但是如果要做进一步验证,可以选择很多试验,如吲哚试验。
蓝色菌落可能是乳糖阴性的大肠杆菌,但更多是气单胞菌。蓝色菌落应该初步认定是大肠菌,以进一步试验。黄色菌落几乎不会是大肠杆菌,而绿色菌落几乎不会不是大肠杆菌,然而,也有例外。一些少见的芽孢杆菌和葡萄球菌能够在滤膜法乳糖葡萄糖醛酸苷琼脂上生长,产生黄色菌落。但是这些菌落很容易通过在麦康凯琼脂上的菌落特征或者通过革兰氏染色鉴别开来。
配方与配制方法:
成分 | g/L |
蛋白胨 | 40.0 |
酵母提取物 | 6.0 |
乳糖 | 30.0 |
酚红 | 0.2 |
十二烷基硫酸钠 | 1.0 |
丙酮酸钠 | 0.5 |
X-Gluc (BCIG) | 0.2 |
琼脂 | 10.0 |
Final pH 7.4±0.2 (25°C) |
配制方法:
用1000ml蒸馏水重悬88g本产品。121°C高温蒸汽灭菌15min。冷却至50℃时,倒入无菌的培养皿中。
实验方法
对于100ml处理过的液体,应该用Φ 47mm,0.45μm滤膜过滤,已获得20-80菌落数。如果预计样本中细菌含量较高,则采用体积较少的液体,或者进行稀释。将过滤后的滤膜放置在MLGA培养基表面,确保没有气泡。推荐的培养过程为,现在30°C培养4h,然后37°C培养14h,以提供活化率。最早12h即可观察到结果,但是为了获得更可靠的结果,平板应该培养至少18h。从培养箱内取出平板后,要在15min内读取结果。因为在冷却过程中黄色可能会有所改变。大肠杆菌菌落呈绿色,其它大肠菌菌落为黄色。统计绿色和黄色菌落数,计算每毫升中大肠菌的数量,用CFU/ml的方式表示。37°C培养24h后,培养物特征如下:
标准菌株 (ATCC) | 生长情况 | 菌落颜色 |
Escherichia coli (ATCC25922) | +++ | 绿色 |
Klebsiella pneumoniae (ATCC13883) | ++ | 黄色,黏液状 |
Enterobacter aerogenes (ATCC13048) | +++ | 黄色 |
Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) | +++ | 粉色 |
Staphylococcus aureus (ATCC25923) | - | - |
Bacillus subtilis (ATCC6633) | - | - |
Salmonella serotype Enteritidis (ATCC13076) | ++ | 粉色 |