| 培养基名称 | MLSTB-MT培养基 (ISO)，十二烷基硫酸盐胰蛋白示（MUG+色氨酸） |
|---|---|
| 英文名称: |
Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan (ISO)，MLSTB-MT (ISO) |
| 培养基类型: | 鉴别培养基 |
| 产品目录号: | M245-01 |
| 产品规格: |
250g 其它规格请联系我们 |
| 保存条件: | 密封，阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
| 产品性状: |
麦秸色粉末。 琥珀色透明液体。在冰箱中冷藏的液体培养基会形成沉淀或浑浊，在室温下变清澈。 |
| 注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行，戴口罩、手套、护目镜。 |
| 相关产品: | 十二烷基硫酸盐胰蛋白示肉汤 |
产品描述：
MLSTB-MT培养基（Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan）是大肠杆菌鉴别液体培养基，用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。
本产品配方采用ISO标准配方。
LST培养基工作原理
大肠菌群时革兰氏阴性杆菌，能够快速发酵乳糖产气（水不溶性气体）。更为准确的定义是35°C条件下能够在LST培养基和BGLB培养基中生长，并且发酵乳糖产气的革兰氏阴性杆菌。在44.5°C条件下，还能够在EC肉汤中发酵乳糖产气的属于大肠菌群的一个子集——粪大肠菌群。
表面活性剂如胆盐、蓖麻油酸钠，一直以来作为抑制成分，用于配制选择性培养基。十二烷基硫酸钠（SDS）在大肠菌选择性培养基中效果最好，完全阻止革兰氏阳性菌生长。MLSTB-MT可以在小量接种的情况下支持大肠菌的密集生长并产生大量气体。磷酸盐是pH缓冲系统，与氯化钠一起可以通过减慢乳糖发酵微生物生长速度来改善产气量。色氨酸是吲哚试验的底物。向培养后的培养基中加入0.5ml科瓦克试剂（二甲基氨基苯甲醛），1min后上层培养基变粉红色。
向培养基中加入4-甲基伞型酮-β-D-葡糖苷酸（MUG）可以提高检测大肠埃希氏菌的灵敏度。不产气的大肠埃希菌菌株也能用MUG鉴别。MUG是一种生荧光化合物。大肠埃希氏菌具有合成Beta-葡萄糖苷酶的能力，水解MUG生成荧光化合物。在366nm波长的紫外灯下，培养基显荧光，实现大肠埃希氏菌的快速检测。
MLSTB-MT培养基的用途：
MLSTB-MT培养基是ISO 11866- 1:2005规定的用于MPN计数法初步检测水、工业废水食品中的大肠菌群。
MLSTB-MT培养基被规定（HPA National Standard Method D5）用于增菌大肠菌群，和初步验证牛奶及奶制品中大肠埃希氏菌的存在。
MLSTB-MT培养基配方与配制方法
| 培养基成分： | 含量：/L |
|---|---|
| 胰蛋白示 | 20.0 g |
| 乳糖 | 5.0 g |
| K2HPO4 | 2.75 g |
| KH2PO4 | 2.75 g |
| NaCl | 5.0 g |
| 十二烷基硫酸钠（SDS) | 0.1 g |
| 4-甲基伞型酮-β-D-葡糖苷酸（MUG） | 0.1 g |
| L-色氨酸 | 1.0 g |
| 终溶液pH | 6.8 ± 0.2 |
配制方法：
1. 称取36.7g本品，加水1L去离子水溶解。
2. 分装10ml培养基到16x160mm试管中，确保液面没过倒置的德拉姆发酵管。
3. 121°C高温蒸汽灭菌15min。
实验方法
Add 1ml of test sample per tube of single-strength medium. For double-strength medium add 10ml of test sample per tube. Repeat for each further dilution.
Incubate all inoculated tubes at 30 C for 24 hours (+ 2 hours). Incubation may be extended for up to 48 hours (+ 2 hours) if gas formation and/or turbidity not observed at 24 hours (+ 2 hours).
After incubation, add 0.5ml sodium hydroxide solution to all tubes. Examine for fluorescence under a long-wave (360-366nm) UV lamp. Add 0.5ml indole (Kovac’s) reagent to all tubes showing fluorescence. Mix & observe after 1 minute. The presence of indole (positive tube) is indicated by the formation of a red colour in the alcoholic phase.
结果与分析
在30°C条件下，在24h-48h内培养基变浑浊并且发酵管中出现气泡的视为大肠菌群。在紫外灯下（波长366nm）培养基显荧光（如上图），且吲哚试验结果阳性为大肠埃希氏菌，如下图。
