| 培养基名称 | 李斯特菌分离培养基；牛津琼脂 |
|---|---|
| 英文名称: | Listeria Isolation Medium；Oxford Agar |
| 培养基类型: | 选择与鉴别培养基 |
| 级别: | for microbiology |
| 品牌: | ELITE-MEDIA |
| 产品目录号: | M724-01、M724-02 |
| 产品规格: | 250g 、500g |
| 产品外观: | 麦秸色均一粉末。 |
| 颜色与澄清度: | 浅绿色，透明凝胶。 |
| 保存条件: | 密封，2-25度保存。 |
| 注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。 |
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产品描述：
李斯特菌分离培养基（Listeria Isolation Medium）也称牛津琼脂，是单增李斯特菌选择与鉴别固体培养基，被推荐用于检测食品和临床样品中的单增李斯特菌。本品已由ISO委员会建议用于单核细胞增多性李斯特菌的选择性分离和鉴别。李斯特菌是革兰氏阳、不产芽孢、微需氧的、不分支、普通、能运动的短杆菌。20°C运动性最强。单增李斯特菌是主要的对人类有致病性的 李斯特菌。单增李斯特菌广泛存在于未加工的食品中,如薰肠、卷心菜色拉、巴氏消毒鲜奶等，也存在于环境中。李斯特菌能够适应 pH5.0~9.6，在超出这个pH范围的食品中也能存活。但食品中李斯特菌含量非常低，要成功的分离出单增李斯特菌非常困难。
工作原理
牛津琼脂配方中硫酸粘菌素对革兰氏阴性菌尤其大肠杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、变形杆菌和嗜血杆 菌等有强抑制作用，对金黄葡萄球菌也有抑制作用。头孢替坦主要抑制产酶革兰阴性菌和厌氧菌。磷霉素对革兰氏阳性和阴性菌均有抑制作用 ，主要抑制革兰氏阴性菌。吖啶黄是革兰氏阳性菌抑制剂，吖啶黄光解产物对李斯特菌有毒性，因此应该避光保存。放线菌酮用于抑制腐生真 菌的生长。七叶苷和铁盐是单增李斯特菌的分离和鉴别的指示剂。李斯特菌水解七叶苷产生的糖苷配基与铁离子反应生成铁酚类化合物给予李 斯特菌菌落黑色晕轮。革兰氏阴性菌完全不能在牛津琼脂上生长，大多数非李斯特菌的革兰氏阳性菌的生长受抑制，但是有些肠球菌科菌株生长较差，也能表现 出七叶苷反应，单通常发生在培养40h后。一些金黄色葡萄球菌也可能生长，但是七叶苷反应阴性。典型李斯特菌菌落在培养24h后即可肉眼 识别。但是培养时间一般会延长24h，以便检测生长速度慢的非典型菌株。李斯特菌分离方法因作者和样本材料而异。选择性增菌和低温增菌 对所有类型的样本都能极大提高检出率。
用途：
牛津琼脂已由ISO委员会建议用于单核细胞增多性李斯特菌的选择性分离和鉴别。除利用分离和初步鉴定单增李斯特菌外，牛津琼脂还被作为培养基基础，配制ASLM培养基。
牛津琼脂用于分离和培养含混合菌群的标本中的单核细胞增多性李斯特菌。
配方与配制方法
| 培养基成分： | 含量/L |
|---|---|
| 哥伦比亚血琼脂基础 | 39.0 g |
| 七叶苷 | 1.0 g |
| 柠檬酸铁铵 | 0.5 g |
| 氯化锂 | 15.0 g |
牛津琼脂选择性添加剂：
| 放线菌酮 | 400 mg |
|---|---|
| 硫酸粘菌素 | 20.0 mg |
| 吖啶黄 | 5.0 mg |
| 头孢替坦 | 2.0 mg |
| 磷霉素 | 10.0 mg |
| pH | 7.0± 0.2 |
配制方法：
1. 称取55.5g本品，用1000ml去离子水重悬浸泡10min。
2. 加热搅拌使其全部溶解。
3. 121°C高温灭菌15min。
4. 待冷却至55°C时加入5ml选择性添加剂，混匀后倒平板。
用5ml70%乙醇溶解抑制性添加剂，过滤除菌。
实验方法
粪便和生物样本：
样品与0.1%蛋白胨水按1:9比例混合后均质。
直接板法
1. 取0.1ml均质后的样本接种到李斯特菌选择性琼脂平板上。
2. 35°C培养时间最长至48h。
3. 在24h和48h检查典型李斯特菌菌落。
选择性增菌法
1. 取0.1ml均质后的样本接种到李斯特菌选择性增菌肉汤中，30°C培养时间最长至7天。
2. 分别在第24h、第48h和第七天，取0.1ml培养物接种到李斯特菌选择性琼脂平板上。
3. 35°C培养48h。
4. 分别在第24h和第48h检查典型菌落。
食品和环境样本
取0.1ml选择性增菌后的样本接种到李斯特菌选择性琼脂平板上。35°C培养48h。分别在第24h和第48h检查典型菌落。
FDA李斯特菌的检测方法
