产品名称: | 尿素琼脂基础(Christensen) |
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英文名称: | Urea Agar Base (Christensen) |
培养基类型: | 鉴别培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA(艾礼培养基) |
产品目录号: | M122-01、M122-02、M122-03 |
产品规格: | 100g、200g |
产品外观: | 乳白色至黄色均一粉末。 |
灭菌后颜色与澄清度: | 浅黄色微不透明凝胶。 |
保存条件: | 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
尿素琼脂基础(Urea Agar Base)加入2%的尿素后,用于检测变形杆菌的快速尿素酶活性和某些肠杆菌科微生物的慢速尿素酶活性。工作原理
当尿素被微生物水解时,产生氨,使得培养基显碱性,酚红指示剂由橘色变粉红色。尿素琼脂基础采用Christensen配方。减低的缓冲剂含量和葡萄糖能够刺激慢速利用尿素的微生物的尿素酶活性,使反应速度加快,并排除假阴性反应。用途:
尿素琼脂基础被推荐用于检测变形杆菌的快速尿素酶活性和某些肠杆菌科微生物的慢速尿素酶活性。尿素琼脂也用于检测其它革兰氏阴性菌,如假单胞菌(Pseudomonas)、巴氏杆菌(Pasteurella)、布鲁氏杆菌(Brucella)的尿素酶活性。
Webb等人还用该培养基区别隐球酵母(Cryptococcus)和其它酵母菌菌种。
配方与配制方法
成分 | g/L |
胃蛋白胨 | 1.0 |
D-葡萄糖 | 1.0 |
氯化钠 | 5.0 |
磷酸氢二钠 | 1.2 |
磷酸二氢钾 | 0.8 |
酚红 | 0.012 |
琼脂 | 15.0 |
pH 6.8 ± 0.2 |
配制方法:
1. 称取24g尿素琼脂基础,用950ml去离子水重悬。
2. 加热煮沸至完全溶解。
3. 115°C灭菌20min。
4. 冷却至50°C 时,加入50ml无菌40%尿素溶液。
5. 混匀后分装10ml到无菌试管中,制备琼脂斜面。
由于尿素受热十分容易分解,不要过度加热也不要重新加热。
实验方法
在斜面上重度接种待测菌。在检测变形杆菌的尿素酶活性时,应该在培养2-5h内读取试验结果。检测肠杆菌科细菌的尿素水解能力时,培养时间要24-48h。延长培养时间,可能会有其它因素引起会培养基呈碱性,因此需要用不含尿素的培养基做阴性对照。结果与分析
35°C培养18-24h后,标准菌株在尿素琼脂基础中生长情况如下:ATCC标准菌株 | 生长情况 | Urease |
Enterobacter aerogenes (ATCC13048) | +++ | - |
Escherichia coli (ATCC25922) | +++ | - |
Proteus vulgaris (ATCC13315) | +++ | + |
Salmonella typhimurium (ATCC14028) | +++ | - |
+ 表示阳性结果,培养基呈粉红色
- 表示阴性结果,不变色