| 产品名称： | 结晶紫中性红胆盐琼脂；VRBA培养基；VRB琼脂培养基 |
|---|---|
| 英文名称： | Violet Red Bile Agar；VRBA；VRB Agar |
| 培养基类型： | 选择性培养基 |
| 级别： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA |
| 产品目录号： | M736-01、M736-02 |
| 产品规格： | 250g、500g |
| 产品外观： | 麦秸色至粉色均一粉末。 |
| 颜色与澄清度： | 紫色凝胶。 |
| 保存条件： | 密封，2-25°C保存。 |
| 注意事项： | 本产中含有刺激性成分。避免摄入、呼入和皮肤接触。 |
| 相关产品： | VRBGA培养基 |
VRBA培养基产品描述：
结晶紫中性红胆盐琼脂(Violet Red Bile Agar)简称VRBA培养基，是选择性固体培养基，被APHA推荐用于 检测和计数奶制品和食品中的乳糖发酵型大肠菌群，尤其是产气大肠杆菌。也用于牛奶和奶制品的微生物学 分析。本培养基采用《细菌学分析手册》和ISO推荐配方。
VRBA培养基原理：
蛋白胨和酵母提取物提供氮、硫、碳、维生素和矿物质。培养基中的胆盐和结晶紫作为大部分革兰氏阳性菌 尤其是葡萄球菌抑制剂。在高于42°C厌氧条件下培养，可以抑制其它革兰氏阴性菌的生长。中性红是酸碱指 示剂，变色范围pH 6.8(红)～8.0(黄)。乳糖作为可发酵的碳源。大肠菌群发酵乳糖产酸，使得培养基pH降 低。乳糖发酵型微生物形成粉色至红色菌落，一般在菌落周围形成一圈红色胆盐沉降带。非乳糖发酵型微生 物则产生无色菌落。结晶紫中性红胆盐琼脂培养基中胆盐含量低，因此实验结果不仅限于肠道菌。结晶紫中性红胆盐琼脂配方与配制方法：
| 成分 | g/L |
| 明胶蛋白胨 | 7.0 |
| 酵母提取物 | 3.0 |
| 氯化钠 | 5.0 |
| 乳糖 | 10.0 |
| 胆盐或胆盐3号 | 1.5 |
| 中性红 | 0.03 |
| 结晶紫 | 0.002 |
| 琼脂 | 12.0 |
| 终溶液pH | 7.4± 0.2 |
配制方法：
1. 称取38.5g本产品，用 1000ml去离子水浸泡10min。彻底混匀后，调节pH至pH 7.4±0.2。
2. 不断搅拌加热，煮沸2min。可选择121°C高温蒸汽灭菌15MIN，但会降低受伤菌的回收率。
3. 冷却至45°C后，接种，混匀倒入无菌100mm培养皿，每个培养皿倒入15-20mL培养基。
4. 待培养基凝固后，倒入3-4ml琼脂，形成一层上层琼脂，以免有菌落在培养基表面生长和蔓延。
VRBA培养基实验方法：
Spread Plate Method:1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.
3. Spread the dilution evenly over the surface of the medium.
4. Using a sterile spreader device, distribute the inoculum evenly over the agar surface.
5. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.
Pour Plate Method:
1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.
2. Cool media to 45-50oC. Maintain in a 45-50o waterbath until ready to pour.
3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.
5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50oC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than 3 hours at 45-50oC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
6. Allow to solidify.
7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.
VRBA培养基结果与分析：
乳糖发酵型微生物，包括大肠菌群，产生粉色至红色菌落，一般在菌落四周有一圈红色的胆盐沉降带。在表面生长的E.coli菌落边缘完整，在培养基内部生长的菌落则呈凸镜状。
某些肠球菌也可能生长，产生针尖大小的枚红色菌落。
非乳糖发酵型微生物形成无色菌落。
