产品名称: | ATCC培养基1136;甲烷杆菌培养基 |
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英文名称: | ATCC Meidum 1136;Methanobacteria medium |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA |
产品目录号: | M1408-01、M1408-02 |
产品规格: | 5L Kit、20L Kit |
产品外观: | 蓝紫色溶液。 |
颜色与澄清度: | 脱氧还原后为淡黄色透明溶液。 |
保存条件: | 密封,避光,2-8°C保存。 |
注意事项: | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述:
ATCC medium 1136:甲烷杆菌培养基(Methanobacteria medium)用于培养甲烷杆菌。1136是在1045的基础上增加了0.1%酵母提取物和50 mM乳酸钠和100 mM甲醇。配方与配制方法:
成分 | 含量 |
酵母提取物 | 1 g |
乳酸钠 | 5.6 g(60%溶液9.3ml) |
甲醇 | 4 ml |
刃天青 | 0.001 g |
矿物盐溶液2 | 50 ml |
矿物盐溶液1 | 25 ml |
8.0% Na2CO3溶液 | 50 ml |
Wolfe矿物盐溶液 | 10 ml |
Wolfe维生素溶液 | 10 ml |
还原剂溶液 | 20 ml |
pH 7.2 |
配制方法:
用822ml蒸馏水溶解以上成分(维生素、还原剂、甲醇除外)。如果配制固体培养基,加入20g琼脂。121℃高温蒸汽灭菌15min。然后在80% N2、20% CO2条件下冷却,脱氧还原(溶液颜色的红色消失,显出本身的淡黄色)。加入wolfe维生素溶液(过滤除菌)、甲醇(过滤除菌)和半胱氨酸/硫化钠还原剂。调节pH至7.2。在相同的厌氧环境下分装到厌氧试管中。
矿物盐溶液 1:
K2HPO4 | 6.0 g |
蒸馏水 | 1.0 L |
矿物盐溶液 2:
KH2PO4 | 6.0 g |
(NH4)2SO4 | 6.0 g |
NaCl | 12.0 g |
MgSO4 . 7H2O | 2.4 g |
CaCl2 . 2H2O | 1.6 g |
蒸馏水 | 1.0 L |
8%Na2CO3溶液:
Na2CO3 | 8.0 g |
蒸馏水 | 100.0 ml |
还原剂(Reducing Agent)
分别称取300mgL-半胱氨酸盐酸盐和300mg Na2S . 9H2O,并分别用10ml水溶解。在N2条件下装入管中。121℃高温蒸汽灭菌15min。然后快速排气冷却。在N2条件下混合两种溶液。混合后的溶液至少可以保存2周。
改良Wolfe矿物质溶液
氨三乙酸 | 1.5 g |
MgSO4 . 7H2O | 3.0 g |
MnSO4 . H2O | 0.5 g |
NaCl | 1.0 g |
FeSO4 . 7H2O | 0.1 g |
CoCl2 . 6H2O | 0.1 g |
CaCl2 | 0.1 g |
ZnSO4 . 7H2O | 0.1 g |
CuSO4 . 5H2O | 0.01 g |
AlK(SO4)2 . 12H2O | 0.01 g |
H3BO3 | 0.01 g |
Na2MoO4 . 2H2O | 0.01 g |
蒸馏水 | 1.0 L |
用500ml蒸馏水溶解氨三乙酸,用KOH调节pH至6.5,使氨三乙酸完全溶解。然后定容至1L。加入余下成分。过滤除菌。
Wolfe维生素溶液
Biotin | 2.0 mg |
Folic acid | 2.0 mg |
Pyridoxine hydrochloride | 10.0 mg |
Thiamine . HCl | 5.0 mg |
Riboflavin | 5.0 mg |
Nicotinic acid | 5.0 mg |
Calcium D-(+)-pantothenate | 5.0 mg |
Vitamin B12 | 0.1 mg |
p-Aminobenzoic acid | 5.0 mg |
Thioctic acid | 5.0 mg |
蒸馏水 | 1.0 L |