| 培养基名称 | OF试验营养琼脂 |
|---|---|
| 英文名称: | OF Test Nutrient Agar |
| 培养基类型: | 鉴定培养基 |
| 产品目录号: | M153-01 |
| 产品规格: | 100g、250g、500g 补充剂需另购 |
| 保存条件: | 密封，阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
| 产品性状: |
浅黄绿色均一粉末。 绿色透明粘稠液体。 |
| 注意事项: |
避免摄入、呼入、皮肤接触。 配制时在通风橱中进行，戴口罩、手 套、护目镜。 |
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产品描述：
OF试验营养琼脂(OF Test Nutrient Agar)是根据Hugh和Leifson方法，展示碳水化合物氧化和发酵分解代谢用的培养基。特别用于鉴别和分类革兰氏阴性肠道细菌。OF试验营养琼脂培养基工作原理
添加的碳水化合物被降解为二氧化碳和酸，表现为酸碱指示剂溴麝香草酚蓝变黄色。有些微生物只能在有氧气存在的情况下降解碳水化合物，而其它微生物能够在无氧条件下降解碳水化合物。在有氧和无氧条件下都变黄色，表明发酵型降解。而仅在有氧条件下培养的试管变黄色说明碳水化合物是通过氧化分解的。氧化分解发生在（近）液面处。发酵分解既发生在表面也发生在培养基内部。观察试管是否变浑浊，以确定有微生物生长。 酪蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和其它营养成分。氯化钠维持培养基渗透压。磷酸盐是缓冲剂。OF试验营养琼脂培养基配方与配制方法
| 组分 | g/L |
| 胰酪蛋白胨 | 2.0 |
| 氯化钠 | 5.0 |
| 磷酸氢二钾 | 0.3 |
| 溴麝香草酚蓝 | 0.08 |
| 琼脂 | 2.5 |
| pH | 7.1 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 称取9.88 g本产品，用1L去离子水溶解。
2. 121°C灭菌15 min。
3. 冷却至50°C，加入100ml过滤除菌的10%D-葡萄糖、乳糖、蔗糖或其它碳水化合物。
4. 混匀后，分装5ml到2支无菌试管中，1支有氧发酵，1支厌氧发酵。
实验方法
对于每种碳水化合物，用分离的纯培养物分别接种到2支试管底部。接种后立即用一层1cm厚的无菌石蜡油覆盖。接种的微生物必须来自对数生长期。在最适温度下至少培养48h。 Mossel和Martin (1961) 报道称，该试验可以在一支试管内完成。前提是加入酵母提取物以改善苛养微生物生长，提供琼脂浓度至1.5%，培养基深度至少8cm。结果与分析
以葡萄糖为碳水化合物，35ºC培养18-48，标准菌株在OF试验营养琼脂中生长情况如下：| 标准菌株 (ATCC) | 生长情况 | 有氧 | 无氧 |
| Escherichia coli (25922) | +++ | AG | AG |
| Alcalescens faecalis (19209) | +++ | K | K |
| Acinetobacter calcoaceticus (19606) | +++ | A | K |
| Pseudomonas aeruginosa (9027) | +++ | A | K |
| Shigella flexneri (12022) | +++ | A | A |
| Vibrio cholerae (15748) | +++ | A | A |
K 中性或碱性反应（不变色）
A 产酸 (黄色)
G 产气 (有时能观察到)
