| 产品名称: | 酵母SC-URA培养基 （SC-U培养基 ） |
|---|---|
| 英文名称: |
SC-U Medium SC Dropout Medium without uracil Yeast Synthetic Drop-out Media |
| 产品目录号: | M300-01 |
| 产品规格: |
20g/瓶 |
| 保存条件: | 密封，室温或4度 |
| 产品说明: | 以葡萄糖为碳源，不能做乳糖诱导表达培养基。 |
产品描述：
SC-URA培养基又称drop-out Medium，是一 种合成培养基。 SD培养基成分是确定的，
包括酵母基础氮源（yeast nitrogen base ， YNB）、硫酸铵、葡萄糖、16种氨基酸和
核苷酸分子。YNB为酵母生长提供生 长因子和无机盐，硫酸铵作为无机氮源，葡萄糖
作为碳源。SC-URA培养基与SC培养基相比，缺少尿嘧啶uracil。
包括酵母基础氮源（yeast nitrogen base ， YNB）、硫酸铵、葡萄糖、16种氨基酸和
核苷酸分子。YNB为酵母生长提供生 长因子和无机盐，硫酸铵作为无机氮源，葡萄糖
作为碳源。SC-URA培养基与SC培养基相比，缺少尿嘧啶uracil。
Biofeng Lab. 提供的预分装SC-U培养基，采用超滤除菌 ，避免营 养成分的破坏；
独立小包装免称量 ，使用方便，避免浪费。
SC-URA培养基用途 ：
- 由于SC-URA培养基成分已知，因此可以用来鉴定酿酒酵母URA3营养缺陷型。
- 筛选酿酒酵母阳性转化子，例如，用pYES2.1-E 、 pESC-URA载体转化酿酒酵母INVSC1时。
- 以葡萄糖为碳源，所以不能用于乳糖诱导的蛋白表达。 诱导实验请选用以棉籽糖为碳源的培养基SC-U（Glac/Raf）
- 乳糖诱导前的酵母菌体扩增，以葡萄糖为碳源可以降低本底水平的表达，提高毒性蛋白产出量。
SC-URA培养基 （URA3 缺陷型）配方（1L）：
- 酵母基础氮源（YNB） 1.7 g （成分见下表）
- 硫酸铵 5 g
- D-葡萄糖 20 g
- L-精氨酸 0.1 g
- L-半胱氨酸 0.1 g
- L-赖氨酸 0.1 g
- L-苏氨酸 0.1 g
- L-天冬氨酸 0.05 g
- L-异亮氨酸 0.05 g
- L-苯丙氨酸 0.05 g
- L-脯氨酸 0.05 g
- L-丝氨酸 0.05 g
- L-酪氨酸 0.05 g
- L-缬氨酸 0.05 g
- L-甲硫氨酸 0.05 g
- L-色氨酸 0.1 g
- L-组氨酸 0.05 g
- L-亮氨酸 0.1 g
- L-腺嘌呤 0.1 g
- 琼脂粉 20g （配制固体培养基）
表格1. 酵母基础氮源（单位：mg）
| 肌醇 | 2.0 |
| 烟酸(维生素B3) | 0.4 |
| 盐酸硫胺素(维生素B1) | 0.4 |
| 硫酸铜 | 0.04 |
| 磷酸二氢钾 | 1000 |
| 硼酸 | 0.5 |
| 盐酸吡哆醇(维生素B6) | 0.4 |
| 泛酸钙(维生素B5) | 0.4 |
| 对氨基苯甲酸 | 0.2 |
| 硫酸镁 | 500 |
| 硫酸锰 | 0.4 |
| 硫酸锌 | 0.4 |
| 氯化铁 | 0.2 |
| 核黄素(维生素B2) | 0.2 |
| 氯化钙 | 100 |
| 碘化钾 | 0.1 |
| 钼酸钠 | 0.2 |
| 生物素(维生素B7、H) | 0.002 |
| 叶酸(维生素B9) | 0.002 |
| 氯化钠 | 100 |
配制方法：
1. 在分析天平上称取上述组分（氨基酸和葡萄糖除外） ，加800 mL去离子水溶解。
2. 15 psi， 121°C 灭菌20 min。
3. 冷却至50°C左右，加入100 mL的20%葡萄糖溶液（预先配制，用0.2 um滤膜过滤除菌）。
4. 加入100 mL 氨基酸混合溶液 （按配方中的量称取16种氨基酸，加入100 mL去离子，用5M NaOH 调节 pH≈10。用0.2 um滤膜过滤除菌）
3. 冷却至50°C左右，加入100 mL的20%葡萄糖溶液（预先配制，用0.2 um滤膜过滤除菌）。
4. 加入100 mL 氨基酸混合溶液 （按配方中的量称取16种氨基酸，加入100 mL去离子，用5M NaOH 调节 pH≈10。用0.2 um滤膜过滤除菌）
Tips：葡萄糖不能预先加入。在高温条件下，单糖类物质会与游 离氨基酸、肽 类发生美拉德反应，生产不溶性深褐色产物，微生物无法利用，且有害，降低培养基营养价值。
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