培养基名称 | 耶尔森氏菌选择琼脂;CIN琼脂;头孢磺啶三氯生新生霉素琼脂 |
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英文名称: | Yersinia Selective Agar;CIN Agar;Cefsulodin Irgasan Novobiocin Agar |
培养基类型: | 选择性培养基,鉴定培养基 |
产品目录号: | M106-01 |
产品规格: | 250g、500g 选择性补充剂需另购 |
保存条件: | 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
产品性状: |
浅黄色粉末。 淡橘红色至淡红色,透明至微不透明凝胶。 |
注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目 镜。 |
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产品描述:
耶尔森氏菌选择琼脂(Yersinia Selective Agar)也称头孢磺啶三氯生新生霉素琼脂(Cefsulodin Irgasan Novobiocin Agar),简称CIN琼脂,是一种选择性固体培养基。CIN琼脂用于培养临床样品、食品和水中的耶尔森氏菌,尤其是小肠结肠炎耶尔森菌(Y. enterocolitica)和假结核耶尔森氏菌(Y. pseudotuberculosis)。
耶尔森氏菌选择琼脂工作原理
当前,多数由耶尔森氏菌引发的人类疾病,主要来自小肠结肠炎耶尔森菌。小肠结肠炎耶尔森菌是耶尔森氏鼠疫杆菌肠道病的致病原。其它具有临床重要性的耶尔森氏菌是假结核耶尔森氏菌和鼠疫耶尔森氏菌,后者是黑死病的罪魁祸首。大多数传染病例是通过污染的食物如生猪肉、海产品、蔬菜、非巴氏灭菌奶、未处理的水传播的。然而,传染也可能通过与染病动物或粪便接触,或者通过跳蚤转播。耶尔森氏菌选择琼脂用于从临床及非临床样品中分离小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森氏菌。本配方基于Schiemann的CIN琼脂培养基,被ISO委员会推荐使用。最初的CIN琼脂配方中的胆盐由脱氧胆酸盐替代,丙酸钠和镁盐有助于提高该微生物的回收效率。
混合蛋白胨提供碳、氮、维生素和其它必需的营养成分。甘露醇发酵菌株,如小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森氏菌,形成带有暗粉色中心的菌落。中性红是酸碱指示剂,变色范围pH 6.8(红)~8.0(黄)。甘露醇发酵产酸,使培养基pH降低至6.8以下,使得中性红颜色由淡橘红色转变为红色。胆酸盐的耶尔森氏菌菌落周围形成不透明的胆酸盐沉降带。甘露醇阴性微生物形成无色菌落和透明菌落。脱氧胆酸盐和结晶紫是革兰氏阳性菌和大多数革兰氏阴性菌抑制剂。氯化钠维持渗透压。抑制剂头孢磺啶、三氯生、新生霉素的添加使得培养基具有高度选择性。
耶尔森氏菌选择琼脂的用途:
CIN琼脂用于选择性分离临床样品、食品和水中的耶尔森氏菌,尤其是小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森氏菌。
耶尔森氏菌选择琼脂配方与配制方法
成分 | G/L |
混合蛋白胨 | 20.0 |
酵母提取物 | 2.0 |
D-甘露醇 | 20.0 |
丙酸钠 | 2.0 |
氯化钠 | 1.0 |
六水合硫酸镁 | 0.01 |
脱氧胆酸盐 | 0.5 |
中性红 | 0.03 |
结晶紫 | 0.001 |
琼脂 | 12.5 |
pH 7.4 ± 0.2 |
配制方法:
1. 称取58g本产品,用1000ml去离子水重悬。
2. 加热煮沸至完全溶解。
3. 121°C 灭菌15min。
4. 冷却至50°C 左右时,加入选择性补充剂,混匀后倒平板。
实验方法
分离耶尔森氏菌可以采用直接板法或倒平板法。22-32°C培养24-48h。或者用无菌磷酸盐缓冲盐水重悬待测样本,4°C培养21天。在此期间,定期接种到耶尔森氏菌琼脂平板上。22-32°C培养24-48h。在耶尔森氏菌选择琼脂生长的干扰菌有气单孢菌、液化沙雷菌、弗氏柠檬酸菌、聚团肠杆菌,需要进一步验证。
结果与分析
22-32°C培养24-48h后,观察培养物特征。ATCC标准菌株在耶尔森氏菌选择琼脂中生长情况如下:
标准菌株(ATCC) 生长情况 回收率[%] 菌落特征 Escherichia coli ATCC25922 + 0 - Enterococcus faecalis ATCC29212 + 0 - Proteus mirabilis ATCC25933 + 0 - Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 + 0 - Yersina enterocolitica ATCC27729 +++ ≥50 透明有深粉色中心 带有胆盐沉降带