| 产品名称： | 精氨酸葡萄糖斜面；AGS培养基 |
|---|---|
| 英文名称： | Arginine-Glucose Slant；AGS |
| 培养基类型： | 鉴别培养基 |
| 级别： | for microbiology |
| 品牌： | ELITE-MEDIA（艾礼培养基） |
| 产品目录号： | M745-01、M745-02、M745-03 |
| 产品规格： | 100g、250g、20 tubes/pack |
| 产品外观： | 乳白色至黄色均一粉末。 |
| 灭菌后颜色与澄清度： | 绿色半透明凝胶。 |
| 保存条件： | 密封，2-25°C保存。 |
| 注意事项： | 避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
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产品描述：
精氨酸葡萄糖斜面（Arginine-Glucose Slant）简称AGS培养基，弧菌鉴别培养基。本产品采用FDA和《细菌学鉴定手册》规定配方。
工作原理
霍乱弧菌和拟态弧菌是精氨酸脱氢酶阴性菌，发酵葡萄糖产酸不产气，不产硫化氢。霍乱弧菌和拟态弧菌培养物表现出碱性斜面（紫色）和酸性管底（黄色）。溴甲酚紫是酸碱指示剂，变色范围pH5.2(黄色)～pH6.8(紫色)。柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠是硫化氢指示系统，如果待测菌产生硫化氢，与指示剂反应产生黑色沉淀，使培养基变黑。用途：
AGS培养基弧菌的鉴别和验证。配方与配制方法
| 成分 | g/L |
|---|---|
| 蛋白胨 | 5.0 |
| 酵母提取物 | 3.0 |
| 胰蛋白胨 | 10.0 |
| 氯化钠 | 20.0 |
| 葡萄糖 | 1.0 |
| L-精氨酸盐酸盐 | 5.0 |
| 柠檬酸铁铵 | 0.5 |
| 硫代硫酸钠 | 0.3 |
| 溴甲酚紫 | 0.02 |
| 琼脂 | 13.5 |
| pH | 6.8-7.0 |
配制方法：
1. 称取58.3g本产品，加入1000ml去离子水浸泡10min。
2. 加热溶解。分装5ml到 13 × 100 mm试管中。
3. 121°C灭菌10-12min。倾斜放置试管，制作斜面。
实验方法
筛选和验证1. 精氨酸葡萄糖斜面。每个疑似T1N1 的培养物采用划线法和穿刺法接种到AGS上。试管盖不要盖严。35° ±2°C过夜培养。霍乱弧菌和拟态弧菌培养物表现出碱性斜面（紫色）和酸性管底（黄色），精氨酸不被水解。不产气不产硫化氢。
2. 耐盐性。将T1N1 培养物小量接种到T1N0 和T1N3液体培养基中。试管35° ±2°C过夜培养。霍乱弧菌和拟态弧菌能够在缺少氯化钠的条件下生长。
3. 线状试验。该试验是很有用的初步鉴定方法，鉴于所有的霍乱弧菌菌株均为阳性。从T1N1 琼脂平板上挑去一个大菌落，在载玻片上用一滴0.5%的脱氧胆酸钠溶液分散。在1min内细胞裂解，液体由浑浊变透明。接种环从载玻片上抬起时可见线状的DNA。
4. 氧化反应。用铂丝（不能用铬丝）或木质敷药棒转移T1N1 培养基上过夜培养的菌落到滤纸上，加上一滴氧化酶试剂（1%N,N,N,N-四甲基苯二胺）。10秒钟内显深紫色即为阳性结果。也可以向T1N1 琼脂平板上滴加氧化酶试剂。霍乱弧菌和拟态弧菌都是氧化酶阳性。
5. 血清凝集试验。对于通过线状试验的疑似霍乱弧菌培养物，使用菌体抗原（O抗原）能够给出重要的流行病学证据。有两种重要的血清型，血清组O1（Ogawa和Inaba）和血清组O139是已知的人类治病原。O1血清组里的两种血清型既存在于典型霍乱弧菌也存在于El Tor生物型中。而O139血清型则仅见于El Tor生物型中。
a. 在玻璃培养皿内或载玻片上，标出三个区域。每个区域加一滴0.85%盐水，用接种环或接种针，在盐水中分散T1N1 培养物。如此重复。检测凝集现象。
b. 加入一滴多价霍乱弧菌O1抗血清到一个区域的菌悬液中，用接种环或接种针混匀。第三个区域加一滴O139抗血清。
c. 倾斜培养皿（载玻片）前后晃动菌悬液1min，在黑色背景下观察结果。阳性反应表现为迅速地、明显地凝集现象。
d. 上一步骤结果阳性的培养物，分别做Ogawa抗血清检测和Inaba抗血清检测。
