| 培养基名称 |
TCBS琼脂、TCBS弧菌选择琼脂、弧菌检测琼脂、霍乱弧菌TCBS培养基、TCBS弧菌检测培养基、TCBS琼脂培养基 TCBS平板、TCBS弧菌检测试剂盒 弧菌培养基、弧菌显色培养基、水产养殖用弧菌培养基、弧菌培养基TCBS |
|---|---|
| 英文名称: | Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar\ TCBS Agar\ Vibrio Selective Agar |
| 培养基类型: | 选择性培养基 |
| 产品目录号: | M746 |
| 产品规格: | 250g 、500g、TCBS平板（20个/包）、TCBS平板（100个/箱）、TCBS弧菌试剂盒（含1个9 CM平板、一次性滴管、一次性涂布棒、一管0.9ml无菌稀释液） |
| 保存条件: | 密封，避光，2-30度，干燥处保存。 |
| 产品性状: | 麦秸色-绿色粉末/绿色凝胶 |
| 注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行，戴口罩、手套、护目镜。 |
| 相关产品: | 无菌TCBS弧菌检测稀释液（0.9mlx10价格是5元，TCBS培养基稀释液请联系客服） |
TCBS培养基图片
产品描述：
TCBS琼脂培养基（Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar）简称弧菌选择琼脂, 弧菌检测培养基，弧菌检测琼脂。TCBS用于分离临床样本中的霍乱弧菌和副溶血弧菌。TCBS培养基也用于水产养殖（如南美白对虾、海水鱼）溶藻弧菌、副溶血弧菌的检测，是水产养殖用弧菌培养基。本产品采用美国FDA和《细菌学鉴定手册》规定配方。
工作原理
碱性条件能够在一定程度上抑制肠道菌的生长，也能促进霍乱弧菌的生长，霍乱弧菌对酸性条件敏感。牛胆汁和胆盐减慢肠道球菌生长，抑制革兰氏阳性菌。该培养基可以在24h内有效抑制所有肠杆菌的生长。蔗糖发酵产酸使培养基pH呈酸性，使得溴甲酚蓝由蓝色变黄色。TCBS培养基指示剂是溴甲酚蓝和和百里酚蓝，这两个化合物是酸碱指示剂。溴甲酚蓝是酸碱指示剂，pH变色范围3.8(黄色)～5.4(蓝绿色)。有两种变色范围：（1）酸范围为pH1.2～2.8，由黄色变红色；（2）碱范围为pH值8.0～9.6，由黄变蓝色。
柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠是硫化氢指示系统，如果待测菌产生硫化氢，与指示剂反应产生黑色沉淀，使培养基变黑。
氯化钠提供嗜盐弧菌的最佳生长和代谢条件。酵母提取物和蛋白胨提供氮源、维生素和氨基酸。
用途：
TCBS琼脂培养基用于从鱼、海鲜和动物源性生物样本中分离霍乱弧菌和其它肠道致病性弧菌，特别是副溶血弧菌。TCBS琼脂培养基也用于控制棘冠海星的爆发。
弧菌在咸淡水和海水养殖中是最常见的一种病原菌，包括鳗弧菌，创伤弧菌，哈维氏弧菌和河流弧菌等。虾病的发生前兆就是弧菌数量增多。我公司专门开发养殖TCBS培养基检测水体中弧菌的数量的试剂盒，就像检测水体溶氧和亚硝酸盐一样可以提前预知虾病是否马上会来。随时监控水体或养殖品种的弧菌数量是否超标。
TCBS琼脂培养基适用于水产养殖（如南美白对虾、海水鱼）溶藻弧菌、副溶血弧菌的检测，为您的养殖提供可参考的数据，帮助您预防养殖细菌性病害。本公司出品的TCBS琼脂培养基平板均为一次性消毒包装随拿随用。
可用于虾苗体内弧菌的检测、水体弧菌的检测。
配方与配制方法
| TCBS培养基成分： | 含量/L |
|---|---|
| 细菌学蛋白胨 | 10.0 g |
| 酵母提取物 | 5.0 g |
| 蔗糖 | 20.0 g |
| 硫代硫酸钠 | 10.0 g |
| 柠檬酸钠 | 10.0 g |
| 胆酸钠 | 3.0 g |
| 牛胆汁 | 5.0 g |
| 氯化钠 | 10.0 g |
| 柠檬酸铁 | 1.0 g |
| 溴麝香草酚蓝 | 0.04 g |
| 百里酚蓝 | 0.04 g |
| 琼脂 | 15.0 g |
| pH | 8.6 ± 0.2 |
配制方法如下：
1. 称取89g本培养基，加1L去离子水浸泡10 min。2. 瓶口用纱布封盖，在火焰上方边摇动边加热至全部溶解。不要用灭菌锅灭菌。在进行TCBS培养基配制时，TCBS是碱性pH8.6左右。
3. 待冷却至50°C时，倒入无菌培养皿中。
4. 制作好的TCBS平板是绿色的。
实验方法
35°C度过夜培养即可。在分离水中的弧菌时，需要采用20-30°C培养。结果与分析
由于弧菌的营养需求多样性，某些菌株可能在TCBS培养基上生长较差或者不生长。在初步分离时，副溶血弧菌可能与 嗜水气单胞菌、类志贺毗邻单胞和假单胞菌相似。
蔗糖发酵型变形杆菌会产生黄色菌落，与弧菌相似。
TCBS培养基不能用于弧菌的氧化酶试验。
TCBS平板霍乱菌鉴别时，几株霍乱弧菌由于蔗糖发酵延迟，可能产生绿色或无色菌落。
在回收病原菌时，TCBS琼脂与非选择性培养基结合使用能够获得最佳回收率。
与月桂基硫酸盐亚碲酸盐琼脂（Lauryl Sulphate Tellurite Agar）相比，TCBS培养基更有优势，因为不需要添加补充剂或血液，在抑制非弧菌生长的同时促进弧菌的生长。
TCBS培养基的鉴别菌落特征/弧菌培养基上菌落特点 TCBS培养基变色和TCBS培养基指示剂菌种识别详细说明，TCBS平板各种菌落情况如下： 菌种 菌落特征 霍乱弧菌 黄色，扁平，直径2-3mm 溶藻弧菌 黄色，直径3-5mm 麦奇尼科夫弧菌 黄色，直径3-4mm 创伤弧菌 黄色或透明菌落 河流弧菌 黄色，直径2-3mm 副溶血弧菌 蓝绿色，直径3-5mm 假单胞菌 蓝绿色，直径1mm 气单孢菌属 蓝色菌落 肠杆菌 透明，直径1mm 拟态弧菌 蓝绿色，直径2-3mm 肠球菌 黄色，直径1mm 变形杆菌 黄色或绿色，直径1mm TCBS平板菌落为黑褐色的情况一般就是指菌落为蓝绿色或者绿色，这是由于在绿色平板上时，蓝绿色和绿色看起来就有点像黑褐色。
TCBS弧菌检测培养基平板使用说明书（弧菌培养皿的使用方法）
1. 原理：弧菌显色试剂只适合弧菌科菌类的显色观察，定量的被测试的水样均匀的涂抹在制备好的试剂板上一定的时间后，通过弧菌产生的酸碱显示出明显可见的色斑，经过计数，计算出水体中每毫升弧菌的数量。
2. 储存（十分重要）：短期常温储存，长期放4度储存，千万不可以冷冻，常温储存有效期1个月，4度保存有效期6个月；同时储存的时候平板需要倒置（有琼脂的那个面朝天上），防止冷凝水对培养基的污染。
3. 弧菌培养基怎么接种呢，具体操作方法如下：
（1）测试样操作：移液枪（0.1ml巴氏滴管）取水样0.1毫升于培养皿的平板（从4度取出后一定要放在室内，恢复到室温）上，用涂布棒（金属涂布棒在使用后需要在酒精灯上面烧一下灭菌同时用之前再在酒精灯上面烧一下，一定要等涂布棒冷却后再涂布操作；或者使用一次性涂布棒）将水样均匀的涂布于平板上，加盖，平放1~2个小时后倒置。下面标准的操作：用恒温箱在36±1℃培养18-24小时。没有条件的实验员进行如下操作：室温25~37度一天（冷天可用泡沫箱加8~10瓦电珠维持温度），20~25度2天。
（2）弧菌计数：显色后的弧菌平板上出现可见的黄色和绿色的色斑，是不同的弧菌特性的显色特征，通过计数每个平板平均色斑（x），可以计算出水样中的弧菌数量Y=X×10（个/ml）。
4. 指标和建议：
一般养殖水体中超过1000个/ml弧菌时，就很容易出现大面积的发病，因此将1000个/ml作为警示指标。在合适的温度和有机质比较丰富的水质中，弧菌数量由500个/ml到1000个/ml通常只需要2天的时间，所以控制弧菌数量应该在500/ml或更低的时候进行。
南美白对虾在养殖20天后，生长量和投饵量迅速的增加，产生大量的有机废料，超出了水体自身的净化能力，给弧菌营造了适宜的营养温床，使对虾容易感染弧菌疾病，表现黑，黄鳃，黑斑，红脚，烂眼，短须，空肠空胃，停食等症状，会出现大量的游塘，趴边和死亡。建议在大面积水族养殖过程中每2到3天检测弧菌量，当弧菌数量上升至300个/ml时，用蛭弧菌+活水宝处理，能维持弧菌量在较低的水平和较长的周期，每10天左右使用一次，如果超过500个/ml,最好先使用消毒剂，如解毒保底安+红体白班消，2天后使用蛭弧菌+活水宝，维持水质，严格控制弧菌量在1000个/ml以下特别在养殖30天以后，更应该注意弧菌数量的变化，做到防治在先。
TCBS弧菌检测平板使用说明书
TCBS弧菌检测平板操作方法
TCBS弧菌检测培养基平板培养后图片
TCBS弧菌检测培养基客户使用实际效果图
TCBS平板虾苗弧菌数检测实施方法
1、检测方法
A、用杯子或适当容器，装100ml纯净水(矿泉水或蒸馏水)，再取约70只虾苗放入杯子或容器中，洗净；
B、依虾苗的大小（以虾苗大小与数量表格为准）取适量虾苗放入稀释液中，用研磨棒研磨至虾体粉碎（以看不到整块苗体为标准）；
C、静置2分钟，取上清液0.1ml（用吸管取上清液到刻度处），加入第二支稀释液中，摇均，再取上清液0.1ml至培养基上；
D、用涂菌棒将液体充分均匀的涂抹于培养基上；
E、将培养基放于室温20~300C静置培养12~24小时后观察；
F、观察时清点培养基上菌落数量，并参照计数方法的采样数量，计算出虾苗弧菌数量
2、虾苗大小与取样数量，以及弧菌计数方法
4、虾苗弧菌数安全标准
A、荧光弧菌观察以12~18小时为准，培养时间超过或不足12~18小时，可能无法观察到弧菌发光现象；
B、因荧光弧菌发出的荧光很弱，所以应在黑暗、无光的条件下观察。
注：荧光弧菌为绿色菌落，如观察无绿色菌落，可不观察荧光弧菌。
