| 培养基名称 | 半固体海洋趋磁球菌自养生长培养基 |
|---|---|
| 英文名称: | Semi-Solid Autotrophic Growth Medium For Magnetococcus Marinus |
| 培养基类型: | 营养培养基 |
| 产品目录号: | M815-01 |
| 产品规格: | 5L Kit；10L Kit |
| 保存条件: |
粉末固体：密封，阴凉干燥处保存。 液体：于2-8°C避光保存。 |
| 产品性状: |
乳白色颗粒性粉末，易结块。 灭菌后培养基：淡黄色透明液体。 |
| 注意事项: |
避免摄入、呼入、皮肤接触。 配制时在通风橱中进行，戴口罩、手套、护目镜。 |
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产品描述：
半固体海洋趋磁球菌自养生长培养基(Semi-Solid Autotrophic Growth Medium For Magnetococcus Marinus)用于趋磁球菌自养生长。培养基配方与配制方法
| 组分 | g/L |
| NaCl | 16.4 |
| MgCl2·6H2O | 3.49 |
| Na2SO4 | 2.74 |
| KCl | 0.47 |
| CaCl2·2H2O | 0.39 |
| NH4Cl | 0.3 |
| 改良Wolfes矿物质溶液 | 5.0 ml |
| 刃天青 | 0.0004 |
| 琼脂 | 2.0 |
| pH 7.2 |
用1L去离子水溶解以上成分（除琼脂外），调节pH值至7.0。加入2g琼脂。在氮气环境下121℃高压蒸汽灭菌15min。冷却至50℃，加入以下无菌溶液。
| 0.5 M磷酸钾缓冲液(pH 7.0) | 1.8 ml |
| 40% Na2S2O3·5H2O溶液 | 3.0 ml |
| 维生素溶液 | 0.5 ml |
| 5% L-Cysteine·HCl·H2O溶液 | 4.0 ml |
| 8% NaHCO3 溶液 | 2.35 ml |
使培养基温度保持在50℃，分装到螺口盖试管中。用无菌的HCl或NaOH调节pH至7.0-7.2。然后加入以下灭菌后的溶液。
| 0.01 M FeSO4·5H2O溶液(用0.02 N HCl溶解) | 2.5 ml |
分装12ml培养基到螺口盖试管中(125x15 mm)。使培养基静止凝固，形成O2梯度层，上层是粉色的氧化层，下层是无色的厌氧层。用注射器接种细胞到恰好粉色与无色交界处。
改良Wolfes矿物质溶液
| 组分 | g/L |
| 氨三乙酸 | 1.5 |
| MgSO4.7H2O | 3.0 |
| MnSO4.xH2O | 0.5 |
| NaCl | 1.0 |
| FeSO4.7H2O | 0.1 |
| CoSO4.7H2O | 0.1 |
| CaCl2.2H2O | 0.1 |
| ZnSO4.7H2O | 0.1 |
| CuSO4.5H2O | 0.01 |
| AlK(SO4)2 | 0.01 |
| H3BO3 | 0.01 |
| Na2MoO4.2H2O | 0.01 |
| Na2MoO4.2H2O | 0.4 |
| CuSO4.5H2O | 0.02 |
| NiCl2.6H2O | 0.01 |
| pH | 7.0 |
用1L去离子水溶解氨三乙酸，加入KOH溶液调节pH至6.5。然后加入其它矿物质。调节pH至7.0。
维生素溶液
| 组分 | mg/L |
| Thiamine·HCl | 900 |
| Inositol | 400 |
| Calcium pantothenate | 40 |
| p-Aminobenzoic acid | 50 |
| Vitamin B12 | 50 |
| Pyridoxine·HCl | 40 |
| Nicotinic acid | 40 |
| Biotin | 1 |
| Folic acid | 20 |
