培养基名称 | Raka-Ray琼脂基础;乳酸菌选择性琼脂基础 |
---|---|
英文名称: | Raka Ray Agar Base;Lactic Acid Bacteria Selective Agar Base |
培养基类型: | 选择性培养基 |
产品目录号: | M281-01 |
产品规格: |
250g、500g、5kg 培养基补充剂需另购 |
保存条件: | 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
产品性状: |
麦秸色均一粉末。极易吸潮。 浅黄色,透明至略不透明的凝胶。 |
注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。 |
相关产品: |
Raka-Ray3号肉汤 10mg/mL 两性霉素B 0.1% 放线菌酮 |
产品描述:
Raka-Ray琼脂 (Raka Ray Agar, Base)也称乳酸菌选择性琼脂(Lactic Acid Bacteria Selective Agar),是乳酸菌选择性培养基,用于选择性分离啤酒酿造工艺中的乳酸细菌。
本产品配方与OXOID CM0777 和 SIGMA 02538 配方相同。
Raka-Ray琼脂培养基工作原理
乳酸杆菌家族中的多个成员构成了酿造过程中重要的腐败菌。营养需求的多样性和生长环境的不同给检测这些微生物带来了很大困难。相当多的被开发用来改善这一状况。Raka-Ray琼脂养基是优化的乳酸杆菌培养基,由Raka-Ray培养基3号(Raka-Ray Medium No. 3)改良而来,后者衍生于通用啤酒琼脂(Universal Beer Agar)。 Raka-Ray培养基3号给出了最高的菌落计数结果,支持最多数目的菌株的计数。Raka-Ray培养基3号能够使得酿酒厂快速准确地监测啤酒中的微生物。
酪蛋白酶解物、肝脏浓缩物、酵母提取物提供生长所需的氮、碳、氨基酸、矿物质、维生素和微量元素。天冬氨酸钾和谷氨酸钾是补充的氨基酸来源。麦芽糖用于检测不能利用葡萄糖作为碳源的乳杆菌。果糖是食果糖乳杆菌(Lactobacillus fructivorans)的碳源。葡萄糖是足球菌可发酵的碳源。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳酸菌对脂肪酸的利用,是乳酸细菌的生长刺激因子。N-乙酰葡萄糖胺、盐酸甜菜碱、肝脏浓缩物也是生长刺激剂。柠檬酸氢二铵和磷酸二氢钾是缓冲剂。而金属盐为乳杆菌的代谢提供重要的离子。另外加入的苯乙醇(3 g/l)抑制革兰氏阴性菌生长,两性霉素B(5 mg/l)和放线菌酮(7mg/l)抑制酵母菌和霉菌的生长。
Raka-Ray琼脂培养基的用途:
Raka-Ray琼脂,由Saha,Sondag和Middlekauff开发,被欧洲酿造公约(EBC)和美国酿造化学家协会(ASBC)推荐用于检测酿造过程和啤酒中的乳酸菌。
Raka-Ray琼脂培养基配方与配制方法
培养基成分: | 含量:g/L |
---|---|
酵母提取物 | 5 |
酪蛋白酶解物 | 20 |
肝脏浓缩物 | 1 |
麦芽糖 | 10 |
D-葡萄糖 | 5 |
果糖 | 5 |
盐酸甜菜碱 | 2 |
柠檬酸氢二铵 | 2 |
天冬氨酸钾 | 2.5 |
谷氨酸钾 | 2.5 |
七水硫酸镁 | 2 |
四水硫酸锰 | 0.66 |
磷酸二氢钾 | 2 |
N-乙酰葡萄糖胺 | 0.5 |
琼脂 | 17 |
终溶液pH | 5.4± 0.2 |
培养基补充剂成分: | 含量/L |
---|---|
0.1%放线菌酮 | 7.0 mL |
去水山梨糖醇单油酸酯 | 10 mL |
2-苯乙醇 | 3 g |
10mg/mL 两性霉素B(可选) | 0.5 mL |
配制方法:
1. 称取本产品77.1g,加1000ml去离子水,加入1ml吐温80,加热溶解。
2. 分装到试管或瓶中。
3. 121°C灭菌15min。
4. 冷却至50-55°C,加入1管乳酸菌选择性补充剂(7ml 0.1%放线菌酮溶液、3g 2-苯乙醇)。混匀后倒入无菌培养皿。
实验方法
表面接种
涂布0.1ml样本,或者将样本滤过滤膜,将滤膜放在琼脂表面。25-30°C,厌氧环境下培养。
覆盖法
55°C 水浴加热的4ml无菌Raka-Ray琼脂,加入1ml样本到试管中。混合均匀后,立即倒入到凝固的Raka-Ray 琼脂表面。25-30°C,厌氧条件下培养。
培养:
一般来说,培养4天即可达到效果。测试用菌株的培养时间不需要超过24h。但是生长速度较慢的微生物所需时间可能达到7天。根据待测样本中乳酸菌的菌种不同,也可以采用半厌氧条件。
结果与分析
以下是37°C 培养18-24h后的培养物特征。
ATCC标准菌株在Raka-Ray琼脂中生长情况如下:
中文名称 ATCC标准菌株 生长情况 肠系膜明串珠菌 Leuconostoc mesenteroides (ATCC8293) +++ 嗜酸乳杆菌 Lactobacillus acidophilus (ATCC11506) +++ 保加利亚乳杆菌 Lactobacillus bulgaricus (ATCC11842) +++ 干酪乳杆菌 Lactobacillus casei (ATCC7469) +++ 莱希曼氏乳杆菌 Lactobacillus leichmannii (ATCC7830) +++ 植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum (ATCC8014) +++ 发酵乳杆菌 Lactobacillus fermentans (ATCC9338) +++ 大肠杆菌 Escherichia coli (ATCC25922) -/+ 酿酒酵母 Sacch. cerevisae (ATCC9763) -