产品名称: | 亮绿乳糖胆盐肉汤;亮绿胆盐(2%)肉汤;BGBB培养基;BGLB肉汤 |
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英文名称: | Brilliant Green Bile 2% Broth;Brilliant Green Lactose Bile Broth;BGLB Broth;BGBB |
培养基类型: | 选择性培养基 |
级别: | for microbiology |
品牌: | ELITE-MEDIA |
产品目录号: | M243-01、M243-02 |
产品规格: | 250g、500g(添加剂需另购) |
产品外观: | 白绿色粉末。 |
颜色与澄清度: | 绿色透明溶液。 |
保存条件: | 密封,2-25度避光保存。 |
注意事项: | 避免呼入和皮肤接触。 |
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产品描述:
亮绿乳糖胆盐肉汤(Brilliant Green Lactose Bile Broth)简称BGLB肉汤,是选择性增菌和富集培养基,用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。用途:
亮绿乳糖胆盐肉汤培养基用于检测或确认产气大肠杆菌(coli-aerogenes)的存在。也被推荐用于44°C大肠埃希氏菌验证法。
在检测水样时,亮绿乳糖胆盐肉汤用于验证乳糖肉汤或十二烷基硫酸盐肉汤(Lauryl sulfate Broth)阳性结果。
原理:
该培养基配方是由AOAC和APHA研发的。胆汁抑制革兰氏阳性菌。亮绿染料抑制厌氧型、乳糖发酵革兰氏阴性杆菌,如产气荚膜梭菌。耐胆汁和亮绿的乳糖发酵型微生物发酵乳糖产气,表现为德拉姆发酵管中出现气泡。产气大肠杆菌的特点是能够快速发酵乳糖产气。食品中的成分可能会降低亮绿和胆汁的抑制性,造成假阳性,因此检测大肠埃希菌时可以加入4-甲基伞型酮-β-D-葡糖苷酸(简称MUG)可以增强检测功能。
配方与配制方法:
培养基成分: | 含量:/L |
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蛋白胨或明胶蛋白胨 | 10.0 g |
乳糖 | 10.0 g |
脱水牛胆汁 | 20.0 g |
亮绿染料 | 0.0133 g |
终溶液pH | 7.2± 0.1 |
配制方法:
1. 称取本品40.0g,加975ml去离子水溶解。
2. 调节pH至7.4。定容至1L。
3. 分装10ml培养基到发酵试管中,确保液面没过倒置的德拉姆发酵管。
4. 121°C高温蒸汽灭菌15min。2X液体培养基不能用高温蒸汽灭菌,
而应该100°C加热30min。
从头配制采用以下方法:
用500ml去离子水溶解蛋白胨和乳糖。用200ml去离子水溶解20g脱水牛胆汁。
混合两种溶液。此时溶液的pH应该在7.0-7.5范围内。用去离子水定容至
975ml,调节pH至7.4。加入13.3ml 0.1%亮绿水溶液。然后定容至1000ml。
分装到发酵试管中,确保液面没过倒置的德拉姆发酵管。121°C高温蒸
汽灭菌15min。最终的pH值为pH7.2 ± 0.1。
实验方法:
为了表明大肠埃希氏菌的存在,BGLB培养基在44 ± 1°C培养48h。阳性结果表现为培养基变浑浊,倒置的德拉姆管中有气泡生成。吲哚试验也在44°C条件下用胰蛋白胨水或蛋白胨水进行,以确认大肠埃希氏菌。水厂质控试验中,采用小于1ml到10ml水样,不能过度稀释样本。小于1ml的水样直接接种到10ml亮绿乳糖胆汁肉汤中。对于10ml水样,则加入到等体积的10ml 2X培养基中。35°C培养48h,有气体产生的则初步认为是产气大肠杆菌。
对于食品样本,则用10的数量级稀释,如10,100,1000,10000。加1ml稀释液到10ml培养基中。检测大肠埃希氏菌,采用44°C培养48h。检测产气大肠杆菌,32°C培养25-48h。或在4°C条件下,培养10天,检测嗜冷大肠菌。
结果与分析:
培养基变浑浊,颜色呈黄绿色,并伴有大量的气体生成,则初步证明产气肠杆菌的存在。标准菌株 | ATCC编号 | 生长情况 | 产气 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | +++ | + |
肠道沙门氏菌 | ATCC14028 | +++ | + |
产气肠杆菌 | NCTC9735 | -/+ | - |
粪肠球菌 | ATCC29212 | - | - |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | - | - |