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Kligler铁琼脂；Kligler琼脂 |
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Kligler Iron Agar；Kligler Agar |
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鉴别培养基 |
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M176-01 |
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250g、500g |
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密封，阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
浅棕色粉末。
红色微不透明凝胶。 |
避免摄入、呼入、皮肤接触。
配制时在通风橱中进行，戴口罩、手套、护目镜。 |
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产品描述：
Kligler琼脂(Kligler Agar)或Kligler铁琼脂(Kligler Iron Agar)，是有用的鉴别培养基，被Kligler推荐用于鉴别革兰氏阴性肠道微生物（肠杆菌）。可向该培养基中添加0.2%尿素，制备铁尿素琼脂。
Kligler铁琼脂工作原理
该培养基中的蛋白胨和酵母提取物作为碳源、氮源和必需的生长营养。葡萄糖和乳糖是可发酵碳水化合物。酚红是酸碱指示剂，变色范围为pH 6.8(红)～8.0(黄)。糖类发酵产酸，使培养基变黄色。非乳糖发酵菌如沙门氏菌和志贺氏菌开始时产生黄色斜面是由于发酵其中少量的葡萄糖产酸形成的。当葡萄糖耗尽后，培养基的斜面转变回红色，这是由于在有氧条件下酸被氧化。在厌氧环境中，即培养基底部，酸不能被氧化，培养基保持黄色。乳糖发酵菌产生黄色斜面和管底，这是因为乳糖含量高，产生大量的酸，即使在有氧气存在的条件下仍然保持酸性条件。两种糖都不能发酵的微生物产生红色斜面和管底。还原硫代硫酸钠生成的硫化氢可以用硫酸亚铁检测，表现为培养基变黑（FeS生成）。氯化钠维持渗透压平衡。
Kligler铁琼脂培养基配方与配制方法
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组分 |
g/L |
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牛肉浸粉 |
3.0 |
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酵母提取物 |
3.0 |
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蛋白胨 |
10.0 |
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酪蛋白胨 |
10.0 |
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乳糖 |
10.0 |
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葡萄糖 |
1.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
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硫酸亚铁 |
0.2 |
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硫代硫酸钠 |
0.5 |
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酚红 |
0.025 |
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琼脂 |
12.0 |
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Final pH |
7.4 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 称取54.7 g本产品，用1000ml去离子水重悬。
2. 不断搅拌，加热使培养基完全溶。
3. 分装到试管中。
4. 121°C高温蒸汽灭菌15min。
5. 制备琼脂斜面。
实验方法：
从肠道菌平板如亚硫酸铋琼脂、DCA、麦康凯琼脂上挑取菌落。然后穿刺接种到试管底部，再在斜面上划线接种。
结果与分析
35°C培养18-24h，ATCC标准菌株在Kligler铁琼脂上的生长情况如下:
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菌株(ATCC) |
生长情况 |
管底 |
斜面 |
产气 |
H2S |
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大肠杆菌 ATCC25922 |
+++ |
黄 |
黄 |
+ |
- |
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弗罗德柠檬酸菌 ATCC8090 |
+++ |
黄、黑 |
黄 |
+ |
+ |
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阴沟肠杆菌 ATCC13047 |
+++ |
黄 |
黄 |
+ |
- |
|
福氏志贺氏菌 ATCC12022 |
+++ |
黄 |
红 |
- |
- |
|
鼠伤寒沙门氏菌 ATCC14028 |
+++ |
黄、黑 |
红 |
+ |
+ |
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伤寒沙门氏菌 ATCC13076 |
+++ |
黄、黑 |
红 |
+ |
+ |
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奇异变形杆菌 ATCC14153 |
+++ |
黄 |
红 |
- |
- |
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普通变形杆菌 ATCC13315 |
+++ |
黄、黑 |
红 |
- |
+ |
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结肠炎耶尔森杆菌 ATCC9610 |
+++ |
黄 |
红 |
多变 |
- |
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M摩根菌 ATCC23585 |
+++ |
黄 |
红 |
多变 |
- |
