| 出品公司: | Promega |
|---|---|
| 载体名称: | pNLF1-C ; pNLF1-C [CMV/Hygro] |
| 质粒类型: | 哺乳动物载体；NanoLuc素酶报告载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 克隆方法: | 限制性内切酶，多克隆位点 |
| 启动子: | CMV IE |
| 载体大小: | 5964 bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Forward:TAATACGACTCACTATAGGG |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | NanoLuc |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素 |
| 筛选标记: | 潮霉素（Hygromycin） |
| 克隆菌株: | TOP10等常规菌株 |
| 宿主细胞（系）: | 常规哺乳动物细胞等 |
| 备注: | pNLF1-C [CMV/Hygro]载体表达NanoLuc融合蛋白；NanoLuc萤光素酶（Nluc）更小（19.1kDa）、更亮（比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍）。 |
| 产品目录号: | N1361 |
| 稳定性: | 瞬表达或稳表达 |
| 组成型/诱导型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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pNLF1-C [CMV/Hygro]载体pNLF1-C质粒基本信息
pNLF1-C [CMV/Hygro]质粒图谱pNLF1-C载体图谱和pNLF1-C [CMV/Hygro]载体序列pNLF1-C质粒序列多克隆位点信息
![pNLF1-C [CMV Hygro]载体图谱](/uploads/载体图谱/pNLF1-C [CMV Hygro] vector map.jpeg)
CMV immediate early enhancer/promoter 1–742
Chimeric intron 857–989
T7 RNA polymerase promoter 1033–1052
Multiple cloning region 1052–1126
Linker 1127–1138
NanoLuc® protein coding region 1139–1648
SV40 late poly(A) region 1773–1994
SV40 early enhancer/promoter 2093–2505
Synthetic hygromycin (Hygr) coding region 2536–3573
Synthetic poly(A) signal 3597–3645
β-lactamase (Ampr) coding region 3906–4766
ColE1-derived plasmid replication origin 4921–4957
pNLF1-C [CMV/Hygro]质粒pNLF1-C载体简介
NanoLuc萤光素酶融合表达载体pNLF1-C [CMV/Hygro] 更小（19.1kDa）、更亮（比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍）的 NanoLuc萤光素酶（Nluc）非常适用于蛋白融合应用。NanoLuc 融合蛋白应用广泛：作为蛋白稳定性报告基因、生物发光法细胞成像（BLI）探针或作为供体信号用于生物发光共振能量转移（BRET）研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。 NanoLuc 蛋白融合载体可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感兴趣蛋白的融合蛋白；有两类形式载体可供选择： pNLF 载体系列：产生 N- 或 C- 端融合全长 Nluc 的融合蛋白或应用传统的克隆方法（多克隆位点）将分泌型 Nluc 克隆到感兴趣的蛋白 N 端。 pF 载体系列：使用 Flexi Vector Cloning System 产生 N- 端或 C- 端融合蛋白；Flexi Vector Cloning System 是一种直接克隆方法，基于两种稀有酶切位点 SgfI 和 PmeI，可以在 Flexi 载体之间转换蛋白编码序列，快速、高效和高保真。 特点 - 优点 轻松定量蛋白丰度变化：使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 进行单一试剂加样，来定量 NanoLuc 融合蛋白的信号，进而检测细胞内蛋白水平。 生物相关性更高：NanoLuc 报告基因光信号更强，内源性表达水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被检测到，可避免过度表达造成的假象。 使蛋白的细胞内动态变化可视化：NanoLuc 报告基因光信号更强，缩短了成像曝光时间，无需反复激发样本，从而降低了激发造成的细胞毒性反应。 改进 BRET 研究技术：NanoLuc 拥有更强的光信号，蓝移的发射光谱，因而与荧光受体的光谱交叉更少，信噪比更佳，动态范围更宽。 灵活的克隆选择：可使用传统克隆方法或 Flexi 克隆系统轻松将 NanoLuc 与目标蛋白的 C 端或 N 端融合。 可实现从瞬时转染到稳定转染的轻松过渡：所有载体都含有用于建立稳定细胞系的哺乳动物筛选标志物。 应用 化合物筛选 蛋白: 蛋白相互作用 蛋白: 小分子相互作用 生物发光成像 蛋白稳定性研究
pNLF1-C [CMV/Hygro]质粒序列pNLF1-C载体序列
LOCUS KF811458 5964 bp DNA circular SYN 03-FEB-2014
DEFINITION C CMV-Hygro Vector pNLF1, complete sequence.
ACCESSION KF811458
VERSION KF811458.1 GI:576890573
KEYWORDS .
SOURCE C CMV-Hygro Vector pNLF1
ORGANISM C CMV-Hygro Vector pNLF1
other sequences; artificial sequences; vectors.
REFERENCE 1 (bases 1 to 5964)
AUTHORS McNamara,B., Kopish,K. and Robers,M.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (06-NOV-2013) Scientific Communications, Promega
Corporation, 5500 E. Cheryl Parkway, Madison, WI 53711, USA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5964
/organism="C CMV-Hygro Vector pNLF1"
/mol_type="other DNA"
/db_xref="taxon:1454393"
regulatory 1..742
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/regulatory_class="promoter"
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CDS <1139..1651
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GWRLCERILA"
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LPETELPAVLQPVAEAMDAIAAADLSQTSGFGPFGPQGIGQYTTWRDFICAIADPHVY
HWQTVMDDTVSASVAQALDELMLWAEDCPEVRHLVHADFGSNNVLTDNGRITAVIDWS
EAMFGDSQYEVANIFFWRPWLACMEQQTRYFERRHPELAGSPRLRAYMLRIGLDQLYQ
SLVDGNFDDAAWAQGRCDAIVRSGAGTVGRTQIARRSAAVWTDGCVEVLADSGNRRPS
TRPRAKEVGRV"
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EIGASLIKHW"
rep_origin 4921..4957
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ORIGIN
1 tcaatattgg ccattagcca tattattcat tggttatata gcataaatca atattggcta
61 ttggccattg catacgttgt atctatatca taatatgtac atttatattg gctcatgtcc
121 aatatgaccg ccatgttggc attgattatt gactagttat taatagtaat caattacggg
181 gtcattagtt catagcccat atatggagtt ccgcgttaca taacttacgg taaatggccc
241 gcctggctga ccgcccaacg acccccgccc attgacgtca ataatgacgt atgttcccat
301 agtaacgcca atagggactt tccattgacg tcaatgggtg gagtatttac ggtaaactgc
361 ccacttggca gtacatcaag tgtatcatat gccaagtccg ccccctattg acgtcaatga
421 cggtaaatgg cccgcctggc attatgccca gtacatgacc ttacgggact ttcctacttg
481 gcagtacatc tacgtattag tcatcgctat taccatggtg atgcggtttt ggcagtacac
541 caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg gggatttcca agtctccacc ccattgacgt
601 caatgggagt ttgttttggc accaaaatca acgggacttt ccaaaatgtc gtaataaccc
661 cgccccgttg acgcaaatgg gcggtaggcg tgtacggtgg gaggtctata taagcagagc
721 tggtttagtg aaccgtcaga tcactagaag ctttattgcg gtagtttatc acagttaaat
781 tgctaacgca gtcagtgctt ctgacacaac agtctcgaac ttaagctgca gaagttggtc
841 gtgaggcact gggcaggtaa gtatcaaggt tacaagacag gtttaaggag accaatagaa
901 actgggcttg tcgagacaga gaagactctt gcgtttctga taggcaccta ttggtcttac
961 tgacatccac tttgcctttc tctccacagg tgtccactcc cagttcaatt acagctctta
1021 aggctagagt attaatacga ctcactatag ggctagcaaa gcgatcgctt ccgaattcct
1081 accgcggata tctagatttg ggcccaattc ctgcaggcga gctctcggct cgagcggcgt
1141 cttcacactc gaagatttcg ttggggactg gcgacagaca gccggctaca acctggacca
1201 agtccttgaa cagggaggtg tgtccagttt gtttcagaat ctcggggtgt ccgtaactcc
1261 gatccaaagg attgtcctga gcggtgaaaa tgggctgaag atcgacatcc atgtcatcat
1321 cccgtatgaa ggtctgagcg gcgaccaaat gggccagatc gaaaaaattt ttaaggtggt
1381 gtaccctgtg gatgatcatc actttaaggt gatcctgcac tatggcacac tggtaatcga
1441 cggggttacg ccgaacatga tcgactattt cggacggccg tatgaaggca tcgccgtgtt
1501 cgacggcaaa aagatcactg taacagggac cctgtggaac ggcaacaaaa ttatcgacga
1561 gcgcctgatc aaccccgacg gctccctgct gttccgagta accatcaacg gagtgaccgg
1621 ctggcggctg tgcgaacgca ttctggcgta aggccgcgac tctagggcat gcaagctgat
1681 ccggctgcta acaaagcccg aaaggaagct gagttggctg ctgccaccgc tgagcaataa
1741 ctagcataac cccttggggc ggccgcttcg agcagacatg ataagataca ttgatgagtt
1801 tggacaaacc acaactagaa tgcagtgaaa aaaatgcttt atttgtgaaa tttgtgatgc
1861 tattgcttta tttgtaacca ttataagctg caataaacaa gttaacaaca acaattgcat
1921 tcattttatg tttcaggttc agggggagat gtgggaggtt tttttaagca agtaaaacct
1981 ctacaaatgt ggtaaaatcg aattttaaca aaatattaac gcttacaatt tcctgatgcg
2041 gtattttctc cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atacgcggat ctgcgcagca
2101 ccatggcctg aaataacctc tgaaagagga acttggttag gtaccttctg aggcggaaag
2161 aaccagctgt ggaatgtgtg tcagttaggg tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc
2221 agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca ggtgtggaaa gtccccaggc
2281 tccccagcag gcagaagtat gcaaagcatg catctcaatt agtcagcaac catagtcccg
2341 cccctaactc cgcccatccc gcccctaact ccgcccagtt ccgcccattc tccgccccat
2401 ggctgactaa ttttttttat ttatgcagag gccgaggccg cctcggcctc tgagctattc
2461 cagaagtagt gaggaggctt ttttggaggc ctaggctttt gcaaaaagct cgattcttct
2521 gacactagcg ccaccatgaa gaagcccgaa ctcaccgcta ccagcgttga aaaatttctc
2581 atcgagaagt tcgacagtgt gagcgacctg atgcagttgt cggagggcga agagagccga
2641 gccttcagct tcgatgtcgg cggacgcggc tatgtactgc gggtgaatag ctgcgctgat
2701 ggcttctaca aagaccgcta cgtgtaccgc cacttcgcca gcgctgcact acccatcccc
2761 gaagtgttgg acatcggcga gttcagcgag agcctgacat actgcatcag tagacgcgcc
2821 caaggcgtta ctctccaaga cctccccgaa acagagctgc ctgctgtgtt acagcctgtc
2881 gccgaagcta tggatgctat tgccgccgcc gacctcagtc aaaccagcgg cttcggccca
2941 ttcgggcccc aaggcatcgg ccagtacaca acctggcggg atttcatttg cgccattgct
3001 gatccccatg tctaccactg gcagaccgtg atggacgaca ccgtgtccgc cagcgtagct
3061 caagccctgg acgaactgat gctgtgggcc gaagactgtc ccgaggtgcg ccacctcgtc
3121 catgccgact tcggcagcaa caacgtcctg accgacaacg gccgcatcac cgccgtaatc
3181 gactggtccg aagctatgtt cggggacagt cagtacgagg tggccaacat cttcttctgg
3241 cggccctggc tggcttgcat ggagcagcag actcgctact tcgagcgccg gcatcccgag
3301 ctggccggca gccctcgtct gcgagcctac atgctgcgca tcggcctgga tcagctctac
3361 cagagcctcg tggacggcaa cttcgacgat gctgcctggg ctcaaggccg ctgcgatgcc
3421 atcgtccgca gcggggccgg caccgtcggt cgcacacaaa tcgctcgccg gagcgcagcc
3481 gtatggaccg acggctgcgt cgaggtgctg gccgacagcg gcaaccgccg gcccagtaca
3541 cgaccgcgcg ctaaggaggt aggtcgagtt tagactctag ccatcacgat ggccgcaata
3601 aaatatcttt attttcatta catctgtgtg ttggtttttt gtgtgaatcg atagcgataa
3661 ggatcctctt tgcgcttgcg ttttcccttg tccagatagc ccagtagctg acattcatcc
3721 ggggtcagca ccgtttctgc ggactggctt tctacgtaat ggtttcttag acgtcaggtg
3781 gcacttttcg gggaaatgtg cgcggaaccc ctatttgttt atttttctaa atacattcaa
3841 atatgtatcc gctcatgaga caataaccct gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga
3901 agagtatgag tattcaacat ttccgtgtcg cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc
3961 ttcctgtttt tgctcaccca gaaacgctgg tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg
4021 gtgcacgagt gggttacatc gaactggatc tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc
4081 gccccgaaga acgttttcca atgatgagca ctttcaaagt tctgctatgt ggcgcggtat
4141 tatcccgtat tgacgccggg caagagcaac tcggtcgccg catacactat tctcagaatg
4201 acttggttga gtactcacca gtcacagaaa agcatcttac ggatggcatg acagtaagag
4261 aattatgcag tgctgccata accatgagtg ataacactgc ggccaactta cttctgacaa
4321 ctatcggagg accgaaggag ctaaccgctt ttttgcacaa catgggggat catgtaactc
4381 gccttgatcg ttgggaaccg gagctgaatg aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca
4441 cgatgcctgt agcaatggca acaacgttgc gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc
4501 tagcttcccg gcaacaatta atagactgga tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc
4561 tgcgctcggc ccttccggct ggctggttta ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg
4621 ggtctcgcgg tatcattgca gcactggggc cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta
4681 tctacacgac ggggagtcag gcaactatgg atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag
4741 gtgcctcact gattaagcat tggtaattcg aaatgaccga ccaagcgacg cccaaccggt
4801 atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa
4861 gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc
4921 gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag
4981 gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt
5041 gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg
5101 aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg
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5341 gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt
5401 taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg
5461 tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatttc aagaagatcc
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5701 ggattaagtg ggggtaatgt ggcctgtacc ctctggttgc ataggtattc atacggttaa
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5881 tccacttact gtctgccctc gtagccatcg agataaaccg cagtactccg gccacgatgc
5941 gtccggcgta gaggatcgag atct
//
