出品公司: | Siga-Aldrich |
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载体名称: | p3xFLAG-CMV-14, p3xFLAG CMV14 |
质粒类型: | 哺乳动物细胞表达载体 |
启动子: | CMV |
拷贝数: | 低拷贝 |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 6310 bp |
5' 测序引物: | CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' |
3' 测序引物: | hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA |
载体标签: | 3XFLAG (C-端) ,含EK蛋白酶识别位点 |
载体抗性: | 氨苄青霉素 |
筛选标记: | Neomycin |
克隆菌株: | -- |
宿主细胞(系): | 常用细胞系,如293、Hela等 |
备注: |
CMV启动子驱动目的蛋白高水平表达;
FLAG标签含8个氨基酸残基(DYKDDDDK),3XFLAG标签含22个氨基酸残基; 一般位于融合蛋白的外表面,具有高度免疫灵敏性,便于检测和纯化目的蛋白; 用EK蛋白酶可将3XFLAG标签切除。 |
产品目录号: | E7908 |
稳定性: | 瞬表达 |
组成型: | 组成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
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p3XFLAG-CMV-14载体 p3xFLAG CMV14质粒基本信息
p3XFLAG-CMV-14质粒图谱 p3xFLAG CMV14载体图谱和p3XFLAG-CMV-14载体序列 p3xFLAG CMV14质粒序列多克隆位点信息
p3XFLAG-CMV-14质粒 p3xFLAG CMV14载体简介
p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体,从pCMV5载体衍生而来,用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位(Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp)。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。
载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。
P3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系,如COS细胞,复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。
p3XFLAG-CMV-14质粒序列 p3xFLAG CMV14载体序列
LOCUS p3xFLAG-CMV-14 6310 bp DNA circular SYN DEFINITION p3xFLAG-CMV-14 ACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. COMMENT This file is created by Vector NTI http://www.biofeng.com/ COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com| FEATURES Location/Qualifiers source 1..6310 /organism="p3xFLAG-CMV-14" /mol_type="other DNA" misc_feature complement(12..155) /label="lacZ_a" misc_feature 126..148 /label="M13_pUC_fwd_primer" promoter 141..157 /label="M13_forward20_primer" promoter 319..895 /label="CMV_immearly_promoter" misc_feature 398..685 /label="CAG_enhancer" promoter 841..912 /label="CMV_promoter" misc_feature 852..872 /label="CMV_fwd_primer" misc_feature 896..915 /label="pCEP_fwd_primer" misc_feature 1044..1058 /label="EK" terminator 1079..1545 /label="hGH_PA_terminator" misc_feature complement(1715..1735) /label="pBABE_3_primer" misc_feature complement(1721..1936) /label="SV40_enhancer" promoter 1733..2001 /label="SV40_promoter" rep_origin 1900..1977 /label="SV40_origin" misc_feature 1962..1981 /label="SV40pro_F_primer" CDS 2084..2878 /label="ORF frame 2" gene 2087..2875 /label="NeoR/KanR" /gene="NeoR/KanR" CDS 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