出品公司: | Promega |
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载体名称: | pFN31K ; pFN31K[hRluc/TK] |
质粒类型: | 哺乳动物载体;NanoLuc素酶报告载体 |
高拷贝/低拷贝: | -- |
克隆方法: | 限制性内切酶,多克隆位点 |
启动子: | CMV IE |
载体大小: | 5128 bp |
5' 测序引物及序列: | T7 Forward:TAATACGACTCACTATAGGG |
3' 测序引物及序列: | -- |
载体标签: | NanoLuc |
载体抗性: | 氨苄青霉素 |
筛选标记: | 新霉素(Neomycin) |
克隆菌株: | TOP10等常规菌株 |
宿主细胞(系): | 常规哺乳动物细胞等 |
备注: | pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi载体表达NanoLuc融合蛋白; NanoLuc萤光素酶(Nluc)更小(19.1kDa)、更亮(比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍)。 |
产品目录号: | N1341 |
稳定性: | 瞬表达或稳表达 |
组成型/诱导型: | 组成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
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pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi载体pFN31K质粒基本信息
pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi质粒图谱pFN31K载体图谱和pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi载体序列pFN31K质粒序列多克隆位点信息
pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi质粒pFN31K载体简介
NanoLuc萤光素酶融合表达载体pFN31K Nluc CMV-neo Flexi 更小(19.1kDa)、更亮(比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍)的 NanoLuc萤光素酶(Nluc)非常适用于蛋白融合应用。NanoLuc 融合蛋白应用广泛:作为蛋白稳定性报告基因、生物发光法细胞成像(BLI)探针或作为供体信号用于生物发光共振能量转移(BRET)研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。 NanoLuc 蛋白融合载体可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感兴趣蛋白的融合蛋白;有两类形式载体可供选择: pNLF 载体系列:产生 N- 或 C- 端融合全长 Nluc 的融合蛋白或应用传统的克隆方法(多克隆位点)将分泌型 Nluc 克隆到感兴趣的蛋白 N 端。 pF 载体系列:使用 Flexi Vector Cloning System 产生 N- 端或 C- 端融合蛋白;Flexi Vector Cloning System 是一种直接克隆方法,基于两种稀有酶切位点 SgfI 和 PmeI,可以在 Flexi 载体之间转换蛋白编码序列,快速、高效和高保真。 特点 - 优点 轻松定量蛋白丰度变化:使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 进行单一试剂加样,来定量 NanoLuc 融合蛋白的信号,进而检测细胞内蛋白水平。 生物相关性更高:NanoLuc 报告基因光信号更强,内源性表达水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被检测到,可避免过度表达造成的假象。 使蛋白的细胞内动态变化可视化:NanoLuc 报告基因光信号更强,缩短了成像曝光时间,无需反复激发样本,从而降低了激发造成的细胞毒性反应。 改进 BRET 研究技术:NanoLuc 拥有更强的光信号,蓝移的发射光谱,因而与荧光受体的光谱交叉更少,信噪比更佳,动态范围更宽。 灵活的克隆选择:可使用传统克隆方法或 Flexi 克隆系统轻松将 NanoLuc 与目标蛋白的 C 端或 N 端融合。 可实现从瞬时转染到稳定转染的轻松过渡:所有载体都含有用于建立稳定细胞系的哺乳动物筛选标志物。 应用 化合物筛选 蛋白: 蛋白相互作用 蛋白: 小分子相互作用 生物发光成像 蛋白稳定性研究
pFN31K Nluc-CMV-neo-Flexi质粒序列pFN31K载体序列
1 TCAATATTGG CCATTAGCCA TATTATTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA 51 ATATTGGCTA TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC 101 ATTTATATTG GCTCATGTCC AATATGACCG CCATGTTGGC ATTGATTATT 151 GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG GTCATTAGTT CATAGCCCAT 201 ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC GCCTGGCTGA 251 CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT 301 AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACG TCAATGGGTG GAGTATTTAC 351 GGTAAACTGC CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT GCCAAGTCCG 401 CCCCCTATTG ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA 451 GTACATGACC TTACGGGACT TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG 501 TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT GGCAGTACAC CAATGGGCGT 551 GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC CCATTGACGT 601 CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC 651 GTAATAACCC CGCCCCGTTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG 701 GAGGTCTATA TAAGCAGAGC TGGTTTAGTG AACCGTCAGA TCACTAGAAG 751 CTTTATTGCG GTAGTTTATC ACAGTTAAAT TGCTAACGCA GTCAGTGCTT 801 CTGACACAAC AGTCTCGAAC TTAAGCTGCA GAAGTTGGTC GTGAGGCACT 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