| 出品公司: | Ambion |
|---|---|
| 载体名称: | pMIR-Report Luciferase |
| 质粒类型: | 哺乳动物细胞miRNA表达报告载体，荧光报告载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6470bp |
| 5' 测序引物及序列: | Luc-F: AGTCAAGTAACAACCGCGA; |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | N-Luciferase(荧光素酶) |
| 载体抗性: | 氨苄抗性 |
| 筛选标记: | 嘌呤霉素 |
| 备注: | 本载体是用来克隆插入miRNA靶序列，评估细胞内miRNA功能的载体。 |
| 产品目录号: | AM5795 |
| 稳定性: | 瞬时表达, 稳定表达都可以 |
| 组成型: | 非组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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载体基本信息
载体图谱质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
pMIR-REPORT miRNA表达报告基因载体系统由一个实验萤火虫荧光素酶报告载体和相关的β-半乳糖苷酶报告对照质粒组成。通过在多克隆位点插入预测的miRNA靶序列， pMIR-REPORT荧光素酶报告miRNA表达报告载体可以被用来进行准确的，定量的，评估细胞内miRNA的功能。它也可以被用来检测siRNA的靶位点和分析3'端非编码区序列对基因表达的影响。 pMIR-REPORT Luciferase载体包含一个CMV启动子和终止子控制下的萤火虫荧光素酶报告基因。在荧光素酶基因的3'端非编码区包含一个多克隆位点，用于插入的预测miRNA的结合靶序列或其他核苷酸序列。通过将预测的miRNA靶序列克隆插入到pMIR-REPORT载体，荧光素酶报告表达就收到调节。这模仿的miRNA靶序列的作用方式。
pMIR-REPORT β-gal质粒是一个β-半乳糖苷酶报告质粒，其被设计用于细胞转染操作流程的标准化探索。 该对照质粒表达的β-半乳糖苷酶，可以用来标准化由于细胞活力和转染效率差异导致的细胞表达水平的多样性。
作为附加的功能，pMIR-REPORT Luciferase和pMIR-REPORT β-gal分别含有嘌呤霉素和新霉素抗性基因，这可以用于选择转染成功的哺乳动物细胞。研究需要的话，抗生素选择可用于构建pMIR-REPORT载体质粒稳表达细胞系。对于大多数应用，瞬表达是足够的，抗生素的筛选也是没有必要的。
载体序列
LOCUS pMIR-Report\Luciferase 6470 bp DNA SYN
DEFINITION pMIR-report
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6470
/organism="pMIR-report"
/mol_type="other DNA"
misc_feature complement(29..51)
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misc_feature complement(250..393)
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promoter 379..395
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/label="ORF frame 2"
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/label="firefly_Luciferase (variant)"
/gene="firefly_Luciferase (variant)"
misc_feature 2116..2134
/label="LucNrev_primer"
promoter complement(2227..2791)
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gene complement(4083..4943)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(4083..4943)
/label="ORF frame 1"
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CDS complement(5447..6046)
/label="ORF frame 2"
promoter complement(6191..6459)
/label="SV40_promoter"
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/label="SV40pro_F_primer"
rep_origin complement(6215..6292)
/label="SV40_origin"
misc_feature 6262..6453
/label="SV40_enhancer"
ORIGIN
1 TCGCGCGTTT CGGTGATGAC GGTGAAAACC TCTGACACAT GCAGCTCCCG GAGACGGTCA
61 CAGCTTGTCT GTAAGCGGAT GCCGGGAGCA GACAAGCCCG TCAGGGCGCG TCAGCGGGTG
121 TTGGCGGGTG TCGGGGCTGG CTTAACTATG CGGCATCAGA GCAGATTGTA CTGAGAGTGC
181 ACCATATGCG GTGTGAAATA CCGCACAGAT GCGTAAGGAG AAAATACCGC ATCAGGCGCC
241 ATTCGCCATT CAGGCTGCGC AACTGTTGGG AAGGGCGATC GGTGCGGGCC TCTTCGCTAT
301 TACGCCAGCT GGCGAAAGGG GGATGTGCTG CAAGGCGATT AAGTTGGGTA ACGCCAGGGT
361 TTTCCCAGTC ACGACGTTGT AAAACGACGG CCAGTGCCAA GCTAGCGGCC GCATACAAAA
421 AACCAACACA CAGATCCAAT GAAAATAAAA GATCCTTTAT TAAGCTTAAC TGTTTAAACC
481 TATGATATCA CGCACGCGTC TATGCCGGCC TATGAGCTCC CTCACTAGTG CGCAGCTTTC
541 ATCACTCGAG CAATTTGGAC TTTCCGCCCT TCTTGGCCTT TATGAGGATC TCTCTGATTT
601 TTCTTGCGTC GAGTTTTCCG GTAAGACCTT TCGGTACTTC GTCCACAAAC ACAACTCCTC
661 CGCGCAACTT TTTCGCGGTT GTTACTTGAC TGGCGACGTA ATCCACGATC TCTTTTTCCG
721 TCATCGTCTT TCCGTGCTCC AAAACAACAA CGGCGGCGGG AAGTTCACCG GCGTCATCGT
781 CGGGAAGACC TGCCACGCCC GCGTCGAAGA TGTTGGGGTG TTGTAACAAT ATCGATTCCA
841 ATTCAGCGGG GGCCACCTGA TATCCTTTGT ATTTAATTAA AGACTTCAAG CGGTCAACTA
901 TGAAGAAGTG TTCGTCTTCG TCCCAGTAAG CTATGTCTCC AGAATGTAGC CATCCATCCT
961 TGTCAATCAA GGCGTTGGTC GCTTCCGGAT TGTTTACATA ACCGGACATA ATCATAGGTC
1021 CTCTGACACA TAATTCGCCT CTCTGATTAA CGCCCAGCGT TTTCCCGGTA TCCAGATCCA
1081 CAACCTTCGC TTCAAAAAAT GGAACAACTT TACCGACCGC GCCCGGTTTA TCATCCCCCT
1141 CGGGTGTAAT CAGAATAGCT GATGTAGTCT CAGTGAGCCC ATATCCTTGT CGTATCCCTG
1201 GAAGATGGAA GCGTTTTGCA ACCGCTTCCC CGACTTCTTT CGAAAGAGGT GCGCCCCCAG
1261 AAGCAATTTC GTGTAAATTA GATAAATCGT ATTTGTCAAT CAGAGTGCTT TTGGCGAAGA
1321 ATGAAAATAG GGTTGGTACT AGCAACGCAC TTTGAATTTT GTAATCCTGA AGGGATCGTA
1381 AAAACAGCTC TTCTTCAAAT CTATACATTA AGACGACTCG AAATCCACAT ATCAAATATC
1441 CGAGTGTAGT AAACATTCCA AAACCGTGAT GGAATGGGAC AACACTTAAA ATCGCAGTAT
1501 CCGGAACGAT TTGATTGCCA AAAATAGGAT CTCTGGCATG CGAGAATCTG ACGCAGGCAG
1561 TTCTATGCGG AAGGGCCACA CCCTTAGGTA ACCCAGTAGA TCCAGAGGAA TTCATTATCA
1621 GTGCAATTGT TTTGTCACGA TCAAAGGACT CTGGTACAAA ATCGTATTCA TTAAAACCGG
1681 GAGGTAGATG AGATGTGACG AACGTGTACA TCGACTGAAA TCCCTGGTAA TCCGTTTTAG
1741 AATCCATGAT AATAATTTTC TGGATTATTG GTAATTTTTT TTGCACGTTC AAAATTTTTT
1801 GCAACCCCTT TTTGGAAACA AACACTACGG TAGGCTGCGA AATGTTCATA CTGTTGAGCA
1861 ATTCACGTTC ATTATAAATG TCGTTCGCGG GCGCAACTGC AACTCCGATA AATAACGCGC
1921 CCAACACCGG CATAAAGAAT TGAAGAGAGT TTTCACTGCA TACGACGATT CTGTGATTTG
1981 TATTCAGCCC ATATCGTTTC ATAGCTTCTG CCAACCGAAC GGACATTTCG AAGTATTCCG
2041 CGTACGTGAT GTTCACCTCG ATATGTGCAT CTGTAAAAGC AATTGTTCCA GGAACCAGGG
2101 CGTATCTCTT CATAGCCTTA TGCAGTTGCT CTCCAGCGGT TCCATCCTCT AGAGGATAGA
2161 ATGGCGCCGG GCCTTTCTTT ATGTTTTTGG CGTCTTCCAT GGTGGATCCA CGGTTCACTA
2221 AACCAGCTCT GCTTATATAG ACCTCCCACC GTACACGCCT ACCGCCCATT TGCGTCAATG
2281 GGGCGGAGTT GTTACGACAT TTTGGAAAGT CCCGTTGATT TTGGTGCCAA AACAAACTCC
2341 CATTGACGTC AATGGGGTGG AGACTTGGAA ATCCCCGTGA GTCAAACCGC TATCCACGCC
2401 CATTGATGTA CTGCCAAAAC CGCATCACCA TGGTAATAGC GATGACTAAT ACGTAGATGT
2461 ACTGCCAAGT AGGAAAGTCC CATAAGGTCA TGTACTGGGC ATAATGCCAG GCGGGCCATT
2521 TACCGTCATT GACGTCAATA GGGGGCGTAC TTGGCATATG ATACACTTGA TGTACTGCCA
2581 AGTGGGCAGT TTACCGTAAA TACTCCACCC ATTGACGTCA ATGGAAAGTC CCTATTGGCG
2641 TTACTATGGG AACATACGTC ATTATTGACG TCAATGGGCG GGGGTCGTTG GGCGGTCAGC
2701 CAGGCGGGCC ATTTACCGTA AGTTATGTAA CGCGGAACTC CATATATGGG CTATGAACTA
2761 ATGACCCCGT AATTGATTAC TATTAATAAC TAAGATCTGG TACCTTGAAT TCATGCTTCT
2821 CCTCCCTTTA GTGAGGGTAA TTCTCTCTCT CTCCCTATAG TGAGTCGTAT TAATTCCTTC
2881 TCTTCTATAG TGTCACCTAA ATCGTTGCAA TTCGTAATCA TGTCATAGCT GTTTCCTGTG
2941 TGAAATTGTT ATCCGCTCAC AATTCCACAC AACATACGAG CCGGAAGCAT AAAGTGTAAA
3001 GCCTGGGGTG CCTAATGAGT GAGCTAACTC ACATTAATTG CGTTGCGCTC ACTGCCCGCT
3061 TTCCAGTCGG GAAACCTGTC GTGCCAGCTG CATTAATGAA TCGGCCAACG CGCGGGGAGA
3121 GGCGGTTTGC GTATTGGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT GCGCTCGGTC
3181 GTTCGGCTGC GGCGAGCGGT ATCAGCTCAC TCAAAGGCGG TAATACGGTT ATCCACAGAA
3241 TCAGGGGATA ACGCAGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC CAGGAACCGT
3301 AAAAAGGCCG CGTTGCTGGC GTTTTTCCAT AGGCTCCGCC CCCCTGACGA GCATCACAAA
3361 AATCGACGCT CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA CCAGGCGTTT
3421 CCCCCTGGAA GCTCCCTCGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC CGGATACCTG
3481 TCCGCCTTTC TCCCTTCGGG AAGCGTGGCG CTTTCTCATA GCTCACGCTG TAGGTATCTC
3541 AGTTCGGTGT AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC CGTTCAGCCC
3601 GACCGCTGCG CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG ACACGACTTA
3661 TCGCCACTGG CAGCAGCCAC TGGTAACAGG ATTAGCAGAG CGAGGTATGT AGGCGGTGCT
3721 ACAGAGTTCT TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGAACAGT ATTTGGTATC
3781 TGCGCTCTGC TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGTTG GTAGCTCTTG ATCCGGCAAA
3841 AAAACCACCG CTGGTAGCGG TGGTTTTTTT GTTTGCAAGC AGCAGATTAC GCGCAGAAAA
3901 AAAGGATCTC AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA GTGGAACGAA
3961 AACTCACGTT AAGGGATTTT GGTCATGAGA TTATCAAAAA GGATCTTCAC CTAGATCCTT
4021 TTAAATTAAA AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC TTGGTCTGAC
4081 AGTTACCAAT GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTCAGCGA TCTGTCTATT TCGTTCATCC
4141 ATAGTTGCCT GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT ACCATCTGGC
4201 CCCAGTGCTG CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT ATCAGCAATA
4261 AACCAGCCAG CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC CGCCTCCATC
4321 CAGTCTATTA ATTGTTGCCG GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA TAGTTTGCGC
4381 AACGTTGTTG CCATTGCTAC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTTGG TATGGCTTCA
4441 TTCAGCTCCG GTTCCCAACG ATCAAGGCGA GTTACATGAT CCCCCATGTT GTGCAAAAAA
4501 GCGGTTAGCT CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAGTA AGTTGGCCGC AGTGTTATCA
4561 CTCATGGTTA TGGCAGCACT GCATAATTCT CTTACTGTCA TGCCATCCGT AAGATGCTTT
4621 TCTGTGACTG GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG GCGACCGAGT
4681 TGCTCTTGCC CGGCGTCAAT ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG
4741 CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA
4801 TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC
4861 AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG
4921 ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG CATTTATCAG
4981 GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA ACAAATAGGG
5041 GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGTCT AAGAAACCAT TATTATCATG
5101 ACATTAACCT ATAAAAATAG GCGTATCACG AGATTGCAGT GAAAAAAATG CTTTATTTGT
5161 GAAATTTGTG ATGCTATTGC TTTATTTGTA ACCATTATAA GCTGCAATAA ACAAGTTAAC
5221 AACAACAATT GCATTCATTT TATGTTTCAG GTTCAGGGGG AGGTGTGGGA GGTTTTTTAA
5281 AGCAAGTAAA ACCTCTACAA ATGTGGTATG GCTGATTATG ATCCTCTAGA GTCGGTGGGC
5341 CTCGGGGGCG GGTGCGGGGT CGGCGGGGCC GCCCCGGGTG GCTTCGGTCG GAGCCATGGG
5401 GTCGTGCGCT CCTTTCGGTC GGGCGCTGCG GGTCGTGGGG CGGGCGTCAG GCACCGGGCT
5461 TGCGGGTCAT GCACCAGGTG CGCGGTCCTT CGGGCACCTC GACGTCGGCG GTGACGGTGA
5521 AGCCGAGCCG CTCGTAGAAG GGGAGGTTGC GGGGCGCGGA GGTCTCCAGG AAGGCGGGCA
5581 CCCCGGCGCG CTCGGCCGCC TCCACTCCGG GGAGCACGAC GGCGCTGCCC AGACCCTTGC
5641 CCTGGTGGTC GGGCGAGACG CCGACGGTGG CCAGGAACCA CGCGGGCTCC TTGGGCCGGT
5701 GCGGCGCCAG GAGGCCTTCC ATCTGTTGCT GCGCGGCCAG CCGGGAACCG CTCAACTCGG
5761 CCATGCGCGG GCCGATCTCG GCGAACACCG CCCCCGCTTC GACGCTCTCC GGCGTGGTCC
5821 AGACCGCCAC CGCGGCGCCG TCGTCCGCGA CCCACACCTT GCCGATGTCG AGCCCGACGC
5881 GCGTGAGGAA GAGTTCTTGC AGCTCGGTGA CCCGCTCGAT GTGGCGGTCC GGGTCGACGG
5941 TGTGGCGCGT GGCGGGGTAG TCGGCGAACG CGGCGGCGAG GGTGCGTACG GCCCGGGGGA
6001 CGTCGTCGCG GGTGGCGAGG CGCACCGTGG GCTTGTACTC GGTCATGGAA GGTCGTCTCC
6061 TTGTGAGGGG TCAGGGGCGT GGGTCAGGGG ATGGTGGCGG CACCGGTCGT GGCGGCCGAC
6121 CTGCAGGCAT GCAAGCTAGC TTTTTGCAAA AGCCTAGGCC TCCAAAAAAG CCTCCTCACT
6181 ACTTCTGGAA TAGCTCAGAG GCCGAGGCGG CCTCGGCCTC TGCATAAATA AAAAAAATTA
6241 GTCAGCCATG GGGCGGAGAA TGGGCGGAAC TGGGCGGAGT TAGGGGCGGG ATGGGCGGAG
6301 TTAGGGGCGG GACTATGGTT GCTGACTAAT TGAGATGCAT GCTTTGCATA CTTCTGCCTG
6361 CTGGGGAGCC TGGGGACTTT CCACACCTGG TTGCTGACTA ATTGAGATGC ATGCTTTGCA
6421 TACTTCTGCC TGCTGGGGAG CCTGGGGACT TTCCACACCA ATCTTTCGTC
//
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载体质粒应用举例
pMIR-REPORT β-gal Control
2019-11-09
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