载体名称: | HIV-1 NL4-3-ΔEnv-EGFP Reporter Vector |
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出品公司: | NIH |
出品公司货号: | NIH# 111000 |
载体又名: |
HIV-1 NL4-3-DeltaEnv-EGFP HIV-1 NL4-3-DeltaE-EGFP HIV-1 NL4-3-DE-EGFP HIV-1 NL4-3-Env-EGFP HIV-1 NL4-3-EGFP pNL4-3-ΔEnv-EGFP pNL4-3-Env-EGFP pNL4-3-EGFP pNL4-3-DeltaE-EGFP pNL4-3-DE-EGFP pNL4-3-DeltaEnv-EGFP HIV-1 NL4.3-ΔEnv-EGFP HIV-1 NL4.3-DeltaEnv-EGFP HIV-1 NL4.3-DeltaE-EGFP HIV-1 NL4.3-DE-EGFP HIV-1 NL4.3-Env-EGFP HIV-1 NL4.3-EGFP pNL4.3-ΔEnv-EGFP pNL4.3-Env-EGFP pNL4.3-EGFP pNL4.3-DeltaE-EGFP pNL4.3-DeltaEnv-EGFP pNL4.3-DE-EGFP |
质粒类型: | 哺乳动物细胞载体;逆病毒包装载体 |
高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
克隆方法: | 限制性内切酶,多克隆位点 |
启动子: | CMV |
载体大小: | 14786 bp |
5' 测序引物及序列: | -- |
3' 测序引物及序列: | -- |
存储人: | Drs. Haili Zhang, Yan Zhou, and Robert Siliciano |
载体抗性: | 氨苄青霉素 |
筛选标记: | 嘌呤霉素(Puromycin) |
克隆菌株: | DH5α ,stbl2等 |
宿主细胞(系): | 常规细胞系(293、CV-1、CHO等) |
备注: |
NL4-3-ΔEnv-EGFP载体,又叫NL4-3-dE-EGFP载体,pNL4-3-DeltaE-EGFP载体,是一个HIV-1 NL4-3荧绿色荧光蛋白报告质粒,包含有缺陷的Nef, Env 和 Vpr. 这个质粒与含有env蛋白表达质粒共转染哺乳细胞,能够包装产生病毒,但是该病毒不具有再次扩增能力,因子病毒只能由共转染的质粒产生一轮病毒。
这个载体全部大小是14664 bp,包括插入的EGFP蛋白(备注:也有一种说法是载体大小为14786 bp)。
该载体表达内质网保留截短Env-EGFP融合蛋白。EGFP(增强型绿色荧光蛋白)基因是从pEGFP-N1质粒中扩增出,包括限制性内切酶位点、KDEL-ER驻留信号肽和终止密码子。
该质粒构建方案是,将PCR产物插入pNL4-3载体骨架的env基因,使env失去活性。
本质粒以绿色荧光蛋白EGFP荧光值为输出读数,可以用于检测假病毒单轮病毒复制感染扩增效果。
它也可以用来定量测量HIV-1的耐药性,方法是在ApaI/AgeI位点中插入所需的序列,替换质粒中的gag-pol区域。
使用ApaI和AgeI的限制性内切酶酶切该质粒会形成约13200 bp和1500 bp的两个片段。 |
产品目录号: | 3418 |
稳定性: | 稳表达 |
组成型/诱导型: | 组成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
生物危害性: | 无 |
参考文献引用: |
H. Zhang, Y. Zhou, C. Alcock, T. Kiefer, D. Monie, J. Siliciano, Q. Li, P. Pham, J. Cofrancesco, D. Persaud and R. F. Siliciano. (2004). Novel single-cell-level phenotypic assay for residual drug susceptibility and reduced replication capacity of drug-resistant human immunodeficiency virus type 1. J Virol, 78(4), 1718-29. PUBMED
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文章引用格式: |
文章引用部分可以这样书写:“The following reagent was obtained through the NIH AIDS Reagent Program, Division of AIDS, NIAID, NIH: HIV-1 NL4-3 ΔEnv EGFP Reporter Vector from Drs. Haili Zhang, Yan Zhou, and Robert Siliciano (cat# 11100)." 同时需要在文章参考文献部分,写上上面的参考文献。 |
载体说明书: |
HIV-1 NL4-3 ΔEnv EGFP载体说明书 HIV-1 NL4-3 ΔEnv EGFP载体说明书2 HIV-1 NL4-3 ΔEnv EGFP载体图谱 |
相关载体: |
pNL4-3 pNL4-3-Luc-R-E- |