| 出品公司: | EMD Biosciences (Novagen) |
|---|---|
| 别名: | pET28b, pet 28b, pET-28(+) |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5368 bp |
| 5' 测序引物: | T7 |
| 5' 测序引物序列: | 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 载体标签: | N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His |
| 载体抗性: | 卡那霉素 |
| 备注: | 载体带有N端凝血酶蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异主要是在多克隆位点; |
| 产品目录号: | 69865-3 |
| 稳定性: | 瞬时表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
| 相关载体： | pET28a |
| 表达宿主菌: | BL21(DE3) 、BLR(DE3)、Rosetta(DE3)、OrigamiB(DE3)、BL21(DE3)pLysS |
| pET表达手册： |
pET表达手册英文版 pET表达手册中文版 |
| pET载体汇总: |
pET-3a pET-11a pET-12a pET-14b pET-15b pET-16b pET-17b pET-19b pET-20b pET-21a pET-22b pET-23a pET-24a pET-25b pET-26b pET-27b pET-28a pET-29a pET-30a pET-31b pET-32a pET-33b pET-34b pET-35b pET-37b pET-39b pET-40b pET-41a pET-42a pET-43.1a pET-44a pET-45b pET-47b pET-48b pET-49b pET-50b pET-51b pET-52b pETDuet-1 pACYCDuet-1 pCDFDuet-1 pRSFDuet-1 pColaDuet-1 |
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pET28b载体基本信息
pET28b载体图谱质粒图谱和多克隆位点信息
pET28b载体简介
pET-28b载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28b载体的单一的 多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET28b载体序列
LOCUS pET-28b (+) 5368 bp DNA Circular SYN
DEFINITION pET-28b (+)
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5368
/organism="pET-28 b (+)"
/mol_type="other DNA"
terminator complement(1..129)
/label="T7_terminator"
misc_feature 69..87
/label="T7_Terminal_primer"
misc_feature complement(206..238)
/label="T7_leader"
misc_feature complement(221..239)
/label="Xpress_fwd_primer"
misc_feature complement(306..322)
/label="T7_transl_en_RBS"
misc_feature complement(340..367)
/label="lacO"
promoter complement(367..385)
/label="T7_promoter"
gene 417..680
/label="tet (300 - 563)"
/gene="tet (300 - 563)"
misc_feature complement(469..488)
/label="pBRrevBam_primer"
CDS 522..1022
/label="ORF frame 3"
misc_feature 763..1854
/label="lacI"
CDS 895..1854
/label="ORF frame 1"
gene 1913..2188
/label="tet (576 - 851)"
/gene="tet (576 - 851)"
misc_feature 2663..2854
/label="ROP"
misc_feature complement(2848..2870)
/label="pGEX_3_primer"
rep_origin complement(3269..3888)
/label="pBR322_origin"
gene 3994..4809
/label="KanR2"
/gene="KanR2"
CDS 3994..4809
/label="ORF frame 1"
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tcccgaccca tttgctgtcc accagtcatg ctagccatat
241 ggctgccgcg cggcaccagg ccgctgctgt gatgatgatg atgatggctg ctgcccatgg
301 tatatctcct tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac
361 aattccccta tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatctcgatc ctctacgccg
421 gacgcatcgt ggccggcatc accggcgcca caggtgcggt tgctggcgcc tatatcgccg
481 acatcaccga tggggaagat cgggctcgcc acttcgggct catgagcgct tgtttcggcg
541 tgggtatggt ggcaggcccc gtggccgggg gactgttggg cgccatctcc ttgcatgcac
601 cattccttgc ggcggcggtg ctcaacggcc tcaacctact actgggctgc ttcctaatgc
661 aggagtcgca taagggagag cgtcgagatc ccggacacca tcgaatggcg caaaaccttt
721 cgcggtatgg catgatagcg cccggaagag agtcaattca gggtggtgaa tgtgaaacca
781 gtaacgttat acgatgtcgc agagtatgcc ggtgtctctt atcagaccgt ttcccgcgtg
841 gtgaaccagg ccagccacgt ttctgcgaaa acgcgggaaa aagtggaagc ggcgatggcg
901 gagctgaatt acattcccaa ccgcgtggca caacaactgg cgggcaaaca gtcgttgctg
961 attggcgttg ccacctccag tctggccctg cacgcgccgt cgcaaattgt cgcggcgatt
1021 aaatctcgcg ccgatcaact gggtgccagc gtggtggtgt cgatggtaga acgaagcggc
1081 gtcgaagcct gtaaagcggc ggtgcacaat cttctcgcgc aacgcgtcag tgggctgatc
1141 attaactatc cgctggatga ccaggatgcc attgctgtgg aagctgcctg cactaatgtt
1201 ccggcgttat ttcttgatgt ctctgaccag acacccatca acagtattat tttctcccat
1261 gaagacggta cgcgactggg cgtggagcat ctggtcgcat tgggtcacca gcaaatcgcg
1321 ctgttagcgg gcccattaag ttctgtctcg gcgcgtctgc gtctggctgg ctggcataaa
1381 tatctcactc gcaatcaaat tcagccgata gcggaacggg aaggcgactg gagtgccatg
1441 tccggttttc aacaaaccat gcaaatgctg aatgagggca tcgttcccac tgcgatgctg
1501 gttgccaacg atcagatggc gctgggcgca atgcgcgcca ttaccgagtc cgggctgcgc
1561 gttggtgcgg atatctcggt agtgggatac gacgataccg aagacagctc atgttatatc
1621 ccgccgttaa ccaccatcaa acaggatttt cgcctgctgg ggcaaaccag cgtggaccgc
1681 ttgctgcaac tctctcaggg ccaggcggtg aagggcaatc agctgttgcc cgtctcactg
1741 gtgaaaagaa aaaccaccct ggcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc
1801 gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa
1861 cgcaattaat gtaagttagc tcactcatta ggcaccggga tctcgaccga tgcccttgag
1921 agccttcaac ccagtcagct ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact
1981 tatgactgtc ttctttatca tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tctgggtcat
2041 tttcggcgag gaccgctttc gctggagcgc gacgatgatc ggcctgtcgc ttgcggtatt
2101 cggaatcttg cacgccctcg ctcaagcctt cgtcactggt cccgccacca aacgtttcgg
2161 cgagaagcag gccattatcg ccggcatggc ggccccacgg gtgcgcatga tcgtgctcct
2221 gtcgttgagg acccggctag gctggcgggg ttgccttact ggttagcaga atgaatcacc
2281 gatacgcgag cgaacgtgaa gcgactgctg ctgcaaaacg tctgcgacct gagcaacaac
2341 atgaatggtc ttcggtttcc gtgtttcgta aagtctggaa acgcggaagt cagcgccctg
2401 caccattatg ttccggatct gcatcgcagg atgctgctgg ctaccctgtg gaacacctac
2461 atctgtatta acgaagcgct ggcattgacc ctgagtgatt tttctctggt cccgccgcat
2521 ccataccgcc agttgtttac cctcacaacg ttccagtaac cgggcatgtt catcatcagt
2581 aacccgtatc gtgagcatcc tctctcgttt catcggtatc attaccccca tgaacagaaa
2641 tcccccttac acggaggcat cagtgaccaa acaggaaaaa accgccctta acatggcccg
2701 ctttatcaga agccagacat taacgcttct ggagaaactc aacgagctgg acgcggatga
2761 acaggcagac atctgtgaat cgcttcacga ccacgctgat gagctttacc gcagctgcct
2821 cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac
2881 agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt
2941 tggcgggtgt cggggcgcag ccatgaccca gtcacgtagc gatagcggag tgtatactgg
3001 cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatatg cggtgtgaaa
3061 taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca
3121 ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg
3181 taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc
3241 agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc
3301 cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac
3361 tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc
3421 tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata
3481 gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc
3541 acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca
3601 acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag
3661 cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta
3721 gaaggacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg
3781 gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc
3841 agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt
3901 ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaac aataaaactg
3961 tctgcttaca taaacagtaa tacaaggggt gttatgagcc atattcaacg ggaaacgtct
4021 tgctctaggc cgcgattaaa ttccaacatg gatgctgatt tatatgggta taaatgggct
4081 cgcgataatg tcgggcaatc aggtgcgaca atctatcgat tgtatgggaa gcccgatgcg
4141 ccagagttgt ttctgaaaca tggcaaaggt agcgttgcca atgatgttac agatgagatg
4201 gtcagactaa actggctgac ggaatttatg cctcttccga ccatcaagca ttttatccgt
4261 actcctgatg atgcatggtt actcaccact gcgatccccg ggaaaacagc attccaggta
4321 ttagaagaat atcctgattc aggtgaaaat attgttgatg cgctggcagt gttcctgcgc
4381 cggttgcatt cgattcctgt ttgtaattgt ccttttaaca gcgatcgcgt atttcgtctc
4441 gctcaggcgc aatcacgaat gaataacggt ttggttgatg cgagtgattt tgatgacgag
4501 cgtaatggct ggcctgttga acaagtctgg aaagaaatgc ataaactttt gccattctca
4561 ccggattcag tcgtcactca tggtgatttc tcacttgata accttatttt tgacgagggg
4621 aaattaatag gttgtattga tgttggacga gtcggaatcg cagaccgata ccaggatctt
4681 gccatcctat ggaactgcct cggtgagttt tctccttcat tacagaaacg gctttttcaa
4741 aaatatggta ttgataatcc tgatatgaat aaattgcagt ttcatttgat gctcgatgag
4801 tttttctaag aattaattca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga aaaataaaca
4861 aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gaaattgtaa acgttaatat
4921 tttgttaaaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca ttttttaacc aataggccga
4981 aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag atagggttga gtgttgttcc
5041 agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc aacgtcaaag ggcgaaaaac
5101 cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc taatcaagtt ttttggggtc
5161 gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc ccccgattta gagcttgacg
5221 gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa gcgaaaggag cgggcgctag
5281 ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc acacccgccg cgcttaatgc
5341 gccgctacag ggcgcgtccc attcgcca
//
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pET28b载体质粒应用举例
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